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1
Définition nécrose, apoptose
Nécrose Mort accidentelle
Explosion cellulaire, Libération du contenu
cellulaire (Lysosome, enz. Protéolytiques,..)
inflammation
2
(No Transcript)
3
(No Transcript)
4
Apoptose et Tumeur
5
?
6
Stress
7
La découverte des cell-death genes ou ced
Génération de mutations par mutagenèse chimique
des larves et recherche des mutations aboutissant
à une mort cellulaire anormale
Caractérisation des gènes ced
Survie des 131 cellules
Mort de lembryon
Mort cellulaire excessive
Défaut dapoptose
Mutations des gènes ced-3, ced-4 et egl-1
Mutation du gène ced-9
Prix Nobel de Médecine 2002 Sydney Brenner, John
Sulston et Robert Horvitz
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Découverte des Cell Death Genes (CED)
ced-3, ced-4 inducteurs dapoptose ced-9 gène
de survie egl-1 gène proapoptotique
/ ICE
Les Gènes de Mort ont leur Equivalent Chez les
Mammifères, Caspases et Bcl-2
9
Lactivation des caspases
Les caspases sont présentes sous forme de
précurseurs inactifs dans la cellule les
procaspases
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(No Transcript)
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Apaf1
Apaf1
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(No Transcript)
13
(No Transcript)
14
Découverte des Cell Death Genes (CED)
ced-3, ced-4 inducteurs dapoptose ced-9 gène
de survie egl-1 gène proapoptotique
/ ICE
Les Gènes de Mort ont leur Equivalent Chez les
Mammifères, Caspases et Bcl-2
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(No Transcript)
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Les Expériences de Transfection
Plasmid Bcl-2 (Différents Isoformes)
Bcl-2
Promoteur
La Transfection Fait Rentrer l ADN Dans La
Cellule Par Précipitation Calcium
Phosphate Par Choc Electrique
Electroporation ParAssociation Membranaire
Liposomes Par Diffusion Passive DEAE-Dextran ?
Transfection
Etude des Conséquences Physiologiques Sur la
Prolifération/Différenciation
Surexpression de Bcl-2
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(No Transcript)
18
(No Transcript)
19
Activation de la Prolifération par le PDGF I. La
Voie de la PI-3 Kinase
20
(No Transcript)
21
(No Transcript)
22
Signalisation Cellulaire Les principales Voies
Impliquées
23
Activation et Translocation
Cellule Activée
Cible Activée
Médiateur
Inhibiteur Bloqué
La Voie dActivation Libère Le Médiateur de son
Inhibiteur Et Permet l Accessibilité aux Cibles
et leur Activation
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Compartimentalisation et Apoptose
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La Relocalisation Varie Suivant Les Isotypes de
la PKC
Activation
a
bII
g
z
Membranes Réticulum
Filaments dActine
Membranes Nucléaires
Golgi
Cible A
Cible B
Cible C
Cible D
Prolifération, Différenciation
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Activation de la Voie des MAP Kinases
27
La Localisation des Médiateurs Joue Un Rôle
Essentiel dans la Réponse Cellulaire
Cible III
Cible II
Cible I
Modifications Cibles I, II, III
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(No Transcript)
29
Activation de Raf par Ras
I. LActivation de Ras-GTP Permet le Recrutement
à la Membrane de la Kinase Raf II. La Fixation de
Raf à la Membrane Déclenche son Activité Kinase
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Inactivation de Raf par les Protéines 14.3.3
31
Inactivation de Raf par les Protéines 14.3.3
L Interaction avec Ras Entraîne une Modification
de l Interaction entre Raf et 14.3.3
Mise en Place de la Forme Active de Raf
LInteraction avec la Membrane et l Activation
Nécessitent 14.3.3
14.3.3
32
(No Transcript)
33
(No Transcript)
34
Le Transport Nucléaire
35
Le TGF-b Active les Facteurs De Transcription Smad
Complexe Smad2/Smad4
36
Les Complexes Cycline/cdk
CDK2
Cycline A
CDK1
G2
Cycline B
S
CDK2
M
Mitose
Cycline E
G1
CDK4-6
Cycline D
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La Localisation de la Cycline B Varie Avec la
Phase du Cycle Cellulaire
Cycline E Nucléaire Cycline B Cytoplasme
Cycline E Nucléaire Cycline B Cytoplasme
Cycline E Nucléaire Cycline B Cytoplasme
Cycline E Nucléaire Cycline B Nucléaire
Déclenchement
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La Cycline B est Cytoplasmique Pendant
l Interphase
G1
S
G2
M
Cytoplasme
Translocation Noyau
Noyau
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Les Séquences de Localisation
Import dans le Noyau Proline-Proline-Lysine-Lysin
e-Lysine-Arginine-Lysine-Valine (Pro-Pro-Lys-Ly
s-Lys-Arg-Lys-Val)
Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val Séquence de
Localisation Nucléaire Nuclear Localisation
Signal NLS
Acides Aminés Basiques Chargés Positivement
Toute Protéine Exposant cette Séquence est
Dirigée vers le Noyau Et Passe au Travers des
Pores Nucléaires de Manière Active
Import dans le Réticulum Endoplasmique
Lysine-Acide Aspartique-Glutamine-Leucine
40
(No Transcript)
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Import Nucléaire, le Rôle de Ran
Orientation
. Ran est une Protéine Nucléaire ou
Cyoplasmique . Ran Nucléaire est Complexée au
GTP . Ran Cytoplasmique est Complexée au GDP
Noyau
Cytoplasme
En fonction de GTP ou GDP, ran nInteragit pas
avec les mêmes Partenaires
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Transport Nucléaire Le Rôle Essentiel de Ran
Recyclage
GDP
GTP
Cytoplasme
Noyau
Recyclage
La Conformation Tridimensionnelle De Ran-GTP
est Différente de Ran-GDP Ces deux Formes ne
Fixent Pas les Mêmes Protéines
GDP
GTP
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Import Nucléaire le Rôle de Ran-GDP et Ran-GTP
44
Export Nucléaire le Rôle de CRM1 et de Ran-GTP
Cytoplasme
Noyau
I. Forte Affinité Pour Ran GTP Formation du
Complexe
NES Nuclear Export Signal
45
La Cycline B est Cytoplasmique Pendant
l Interphase
G1
S
G2
M
Cytoplasme
Noyau
Pendant l Interphase, La Cycline B Navigue
entre Le Cytoplasme et le Noyau Doù elle est
Expulsée
CRM1 Expulse la Cycline B du Noyau Tout au long
de l Interphase
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L Association de la Cycline B avec CRM1 Varie
Au Cours du Cycle Cellulaire
G2/ Mitose
Interphase
Cycline B Non Phosphorylée
La Phosphorylation de la Cycline B Dicte sa
Localisation Cellulaire en Modulant son
Interaction avec le Facteur CRM1
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(No Transcript)
48
La Technique de Gel Retard
Formation d un Complexe entre la Protéine et la
Sonde Marquée
Le Gel Retard Permet dEtudier la Liaison à lADN
dun Facteur de Transcription
49
La Technique de Gel Retard
Protéine
50
La Stimulation de la Cellule se Traduit par la
Migration de NF-kB Dans le Noyau et son
Interaction avec l ADN
51
(No Transcript)
52
(No Transcript)
53
(No Transcript)
54
(No Transcript)
55
L Ubiquitine dirige I-kB Vers le Protéasome
56
(No Transcript)
57
(No Transcript)
58
L ActivationDirige la PKC vers sa Cible
La Liaison entre la PKC et la PS Permet le
Rapprochement avec le Substrat Et la
Phosphorylation
59
Relocalisation des Isoformes de la PKC
Golgi
Association Avec la PhosphatidylSérine
Quelle est la Spécificité DAssociation entre la
PKC Et la PhosphatidylSérine ?
60
Régulation des Isoformes de la PKC par le Système
Rick/Rack
Receptors for Inactive C-Kinases RICK
Protéines Fixant les Isoformes Inactifs De la
PKC
Receptors for Activated C-Kinases RACK
Protéines Fixant les Isoformes Actives De la
PKC
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Inactivation de la PKC et RICK
Le Repliement Permet la Fixation des Protéines
RICK
Domaine  PseudoSubstrat 
RICK
Domaine De Fixation du Substrat
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Inactivation de la PKC et RICK
Les Protéines RICK servent D Ancres pour Bloquer
Les Isoformes de la PKC
Il Existe Différentes Formes de Protéines RICK
pour Plusieurs Compartiments
63
Activation de la PKC et RACK
RICK
R A C K
L Activation de la PKC (DAG, CA2), Dissocie la
PCK des Protéines RICK Pour Permettre son
Association avec les Protéines RACK
Les RACK Sont Situées à Proximité des Cibles que
la PKC Doit Phosphoryler
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Activation de la PKC et RACK
Les Protéines RACK servent D Ancres pour Bloquer
Les Isoformes Actives de la PKC
Il Existe Différentes Formes de Protéines RACK
pour Plusieurs Compartiments
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Régulation des Isoformes de la PKC par le Système
Rick/Rack
Le Système d Adressage Assure la Spécificité De
la Réponse due à la PKC
g
b
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Activation Cellulaire et Recrutement
Médiateur De Localisation
M1
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Activation Cellulaire et Recrutement
Domaines d Interactions
Réponse Cellulaire
Pas de Réponse