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Diferen

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T cnicas: a) voltage clamp cl ssico, b) patch clamp. Limites de medida. Informa es de correntes macrosc picas: a) valores de corrente e de condut ncia; b) ... – PowerPoint PPT presentation

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Title: Diferen


1
Diferenças de Potencial elétrico nas membranas
celulares de membrana
Potencial de Repouso - Universal - Célula sempre
eletricamente negativa - -90mVltVmlt-20mV - Estável
em escala de tempo de s.
Excitabilidade elétrica - Potenciais geradores
receptores e sinapses. Oscilações graduadas -
Potenciais de ação resposta tudo-ou-nada -
Escala de tempo de ms
Diferenças de potencial elétrico em organelas -
Membrana interna de mitocôndrias
2
Sistemas de medidas - Definições
  • Medidas Atribuição de números a objetos baseada
    em regras
  • Instrumentos Equipamentos para a medida
  • Variáveis Manifestam-se como formas de energia
    (corrente, voltagem, etc)
  • Propriedades Características de de objetos que
    manipulam a energia
  • Valor Relaciona a magnitude ao zero.
  • Amplitude Relaciona magnitude ao valor médio
    (DC, linha de base, média)
  • Valores de pico Desvios positivos ou negativos
    do zero
  • Amplitude de pico desvios dos valores médios

3
Análise Eletrofisiológica
  • 1. Fixação de corrente - Medida da diferença de
    potencial elétrico. Registros extracelulares de
    oscilações elétricas. Registros intracelulares de
    diferenças de potencial estacionárias e de
    oscilações.
  • Limites de medida. Conversor de impedância e
    amplificadores
  • Erros a) resistência dos eletródios e impedância
    do instrumento de medida b) potenciais de
    difusão em eletródios de Ling-Gerard.
  • Informações que se podem obter a) Valores do
    potencial b) Potenciais de diluição e
    permeabilidades (Hodgkin e Horowicz) c) valores
    das correntes (plano de fase).
  • 2. Fixação de Voltagem (gf(C,V)
  • Fluxo de corrente através de membranas celulares
    a) pela bicamada, b) por transportadores e c) por
    canais.
  • Fluxo de corrente por canais correntes
    microscópicas e macroscópicas . Canais são
    estocásticos IiNPi.
  • Técnicas a) voltage clamp clássico, b) patch
    clamp. Limites de medida.
  • Informações de correntes macroscópicas a)
    valores de corrente e de condutância b)
    cinéticas das condutâncias c) processos que
    modulam os canais d) Farmacologia dos canais.
  • Informações de correntes microscópicas (análise
    estocástica) condutância do canal
    (seletividade) b) tempo de residência e
    constantes de velocidade.

4
Medidas da diferença de potencial elétrico em
sistemas biológicos
10mm
5
Análise Eletrofisiológica
  • 1. Fixação de corrente - Medida da diferença de
    potencial elétrico. Registros extracelulares de
    oscilações elétricas. Registros intracelulares de
    diferenças de potencial estacionárias e de
    oscilações.
  • Limites de medida. Conversor de impedância e
    amplificadores
  • Erros a) resistência dos eletródios e impedância
    do instrumento de medida b) potenciais de
    difusão em eletródios de Ling-Gerard.
  • Informações que se podem obter a) Valores do
    potencial b) Potenciais de diluição e
    permeabilidades (Hodgkin e Horowicz) c) valores
    das correntes (plano de fase).
  • 2. Fixação de Voltagem (gf(C,V)
  • Fluxo de corrente através de membranas celulares
    a) pela bicamada, b) por transportadores e c) por
    canais.
  • Fluxo de corrente por canais correntes
    microscópicas e macroscópicas . Canais são
    estocásticos IiNPi.
  • Técnicas a) voltage clamp clássico, b) patch
    clamp. Limites de medida.
  • Informações de correntes macroscópicas a)
    valores de corrente e de condutância b)
    cinéticas das condutâncias c) processos que
    modulam os canais d) Farmacologia dos canais.
  • Informações de correntes microscópicas (análise
    estocástica) condutância do canal
    (seletividade) b) tempo de residência e
    constantes de velocidade.

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Medidas Extracelulares
5mV
2ms
ECG EEG
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Análise Eletrofisiológica
  • 1. Fixação de corrente - Medida da diferença de
    potencial elétrico. Registros extracelulares de
    oscilações elétricas. Registros intracelulares de
    diferenças de potencial estacionárias e de
    oscilações.
  • Limites de medida. Conversor de impedância e
    amplificadores
  • Erros a) resistência dos eletródios e impedância
    do instrumento de medida b) potenciais de
    difusão em eletródios de Ling-Gerard.
  • Informações que se podem obter a) Valores do
    potencial b) Potenciais de diluição e
    permeabilidades (Hodgkin e Horowicz) c) valores
    das correntes (plano de fase).
  • 2. Fixação de Voltagem (gf(C,V)
  • Fluxo de corrente através de membranas celulares
    a) pela bicamada, b) por transportadores e c) por
    canais.
  • Fluxo de corrente por canais correntes
    microscópicas e macroscópicas . Canais são
    estocásticos IiNPi.
  • Técnicas a) voltage clamp clássico, b) patch
    clamp. Limites de medida.
  • Informações de correntes macroscópicas a)
    valores de corrente e de condutância b)
    cinéticas das condutâncias c) processos que
    modulam os canais d) Farmacologia dos canais.
  • Informações de correntes microscópicas (análise
    estocástica) condutância do canal
    (seletividade) b) tempo de residência e
    constantes de velocidade.

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(No Transcript)
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Análise Eletrofisiológica
  • 1. Fixação de corrente - Medida da diferença de
    potencial elétrico. Registros extracelulares de
    oscilações elétricas. Registros intracelulares de
    diferenças de potencial estacionárias e de
    oscilações.
  • Limites de medida. Conversor de impedância e
    amplificadores
  • Erros a) resistência dos eletródios e impedância
    do instrumento de medida b) potenciais de
    difusão em eletródios de Ling-Gerard.
  • Informações que se podem obter a) Valores do
    potencial b) Potenciais de diluição e
    permeabilidades (Hodgkin e Horowicz) c) valores
    das correntes (plano de fase).
  • 2. Fixação de Voltagem (gf(C,V)
  • Fluxo de corrente através de membranas celulares
    a) pela bicamada, b) por transportadores e c) por
    canais.
  • Fluxo de corrente por canais correntes
    microscópicas e macroscópicas . Canais são
    estocásticos IiNPi.
  • Técnicas a) voltage clamp clássico, b) patch
    clamp. Limites de medida.
  • Informações de correntes macroscópicas a)
    valores de corrente e de condutância b)
    cinéticas das condutâncias c) processos que
    modulam os canais d) Farmacologia dos canais.
  • Informações de correntes microscópicas (análise
    estocástica) condutância do canal
    (seletividade) b) tempo de residência e
    constantes de velocidade.

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Resistência de entrada do equipamento
11
Amplificadores Operacionais
12
Amplificadores operacionais
Amplificador operacional
Voltage clamp
Conversor corrente-voltagem
Seguidor
13
Análise Eletrofisiológica
  • 1. Fixação de corrente - Medida da diferença de
    potencial elétrico. Registros extracelulares de
    oscilações elétricas. Registros intracelulares de
    diferenças de potencial estacionárias e de
    oscilações.
  • Limites de medida. Conversor de impedância e
    amplificadores
  • Erros a) resistência dos eletródios e impedância
    do instrumento de medida b) potenciais de
    difusão em eletródios de Ling-Gerard.
  • Informações que se podem obter a) Valores do
    potencial b) Potenciais de diluição e
    permeabilidades (Hodgkin e Horowicz) c) valores
    das correntes (plano de fase).
  • 2. Fixação de Voltagem (gf(C,V)
  • Fluxo de corrente através de membranas celulares
    a) pela bicamada, b) por transportadores e c) por
    canais.
  • Fluxo de corrente por canais correntes
    microscópicas e macroscópicas . Canais são
    estocásticos IiNPi.
  • Técnicas a) voltage clamp clássico, b) patch
    clamp. Limites de medida.
  • Informações de correntes macroscópicas a)
    valores de corrente e de condutância b)
    cinéticas das condutâncias c) processos que
    modulam os canais d) Farmacologia dos canais.
  • Informações de correntes microscópicas (análise
    estocástica) condutância do canal
    (seletividade) b) tempo de residência e
    constantes de velocidade.

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(No Transcript)
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Análise Eletrofisiológica
  • 1. Fixação de corrente - Medida da diferença de
    potencial elétrico. Registros extracelulares de
    oscilações elétricas. Registros intracelulares de
    diferenças de potencial estacionárias e de
    oscilações.
  • Limites de medida. Conversor de impedância e
    amplificadores
  • Erros a) resistência dos eletródios e impedância
    do instrumento de medida b) potenciais de
    difusão em eletródios de Ling-Gerard.
  • Informações que se podem obter a) Valores do
    potencial b) Potenciais de diluição e
    permeabilidades (Hodgkin e Horowicz) c) valores
    das correntes (plano de fase).
  • 2. Fixação de Voltagem (gf(C,V)
  • Fluxo de corrente através de membranas celulares
    a) pela bicamada, b) por transportadores e c) por
    canais.
  • Fluxo de corrente por canais correntes
    microscópicas e macroscópicas . Canais são
    estocásticos IiNPi.
  • Técnicas a) voltage clamp clássico, b) patch
    clamp. Limites de medida.
  • Informações de correntes macroscópicas a)
    valores de corrente e de condutância b)
    cinéticas das condutâncias c) processos que
    modulam os canais d) Farmacologia dos canais.
  • Informações de correntes microscópicas (análise
    estocástica) condutância do canal
    (seletividade) b) tempo de residência e
    constantes de velocidade.

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Fixação de voltagem
Vm
i
Vc
10mm
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(No Transcript)
18
Eletrodifusão
19
(No Transcript)
20
Prêmio Nobel de 1963
Andrew Fielding Huxley 1917-
Alan LLoyd Hodgkin 1914-1998
John Carew Eccles 1903-1997
21
Patch clamping
10mm
22
(No Transcript)
23
Patch clamp Configurações
24
(No Transcript)
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Era patch clamp
Prêmio Nobel de 1991 Erwin Neher, 1944- B.
Sakmann, 1942-
1952 Hodgkin,Huxley
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