Title: ANLISIS ELECTROQUMICO DE LAS INTERACCIONES ENTRE MEDIADORES DE LA ENZIMA LACASA, DE INTERS INDUSTRIA
1ANÁLISIS ELECTROQUÍMICO DE LAS INTERACCIONES
ENTRE MEDIADORES DE LA ENZIMA LACASA, DE INTERÉS
INDUSTRIAL Y COMPUESTOS MODELOS DE
LIGNINAPARTE II CARACTERIZACIÓN DE LA
INTERACCIÓN ENTRE MEDIADORES NATURALES,
SINTÉTICOS Y DE TIPO N-OH, CON COMPUESTOS MODELOS
DE LIGNINAS.
2LACASA
Los hongos ligninolíticos producen diversos
enzimas de interés industrial. Entre ellas, las
lacasas que tienen aplicaciones biotecnológicas
de interés
- Industria textil
- Biosensores
- Industria alimentaria
- Industria papelera
3LIGNINA
4El proceso LMS puede representarse en este
esquema
se recupera tanto la enzima como el mediador
actúan de catalizadores
1) Eredox de la lacasa
Reactividad del sistema
2) habilidad y reactividad del radical generado
5Condiciones experimentales Medio citrato sódico
0.1M a pH 6 Técnica voltamperometría cíclica
6(No Transcript)
7Mediadores usados
83) reactividad con la lignina
9En la celda electroquímica ocurren las siguientes
reacciones
M ? Mox e? (electrodo) fase heterogénea
Se regenera el mediador que vuelve nuevamente a
oxidarse
Mox lignina? M ligninaox (disolución) fase
homogénea
Midiendo la corriente de oxidación del mediador
en ausencia y presencia del compuesto modelo de
lignina o de la lignina es posible establecer su
reactividad.
10Resultados voltamperométricos
ABTS 0.2 m Alcohol veratrílicio 2 mM v 0.02
Vs-1
11Acetosiringona 0.4 mM Alcohol veratrílico 20
mM lignina 1 mg/ml v 0.01 Vs-1
12Acido violúrico 0.4 mM Alcohol veratrílico 20
mM Alcohol anisílico 20 mM v 0.02 V s-1
13 lignina (1mg/ml)
144) reactividad con la lacasa
La lacasa usada en este trabajo, ha sido
producida por un nuevo hongo ligninolítico
aislado de suelos de la isla de Tenerife, el
Fusarium proliferatum por la Lcda. K. González
Arbona (Prof. M.A. Falcón)
gran estabilidad frente al pH (2-9)
Características
gran estabilidad frente a T (50 de durante 2h a
50ºC)
Se ha probado con el ABTS, haciendo uso, también,
de la voltamperometría cíclica
15Análisis electroquímico del ABTS con lacasa
En la celda electroquímica están ocurriendo las
siguientes reacciones
lacasa ? lacasaox e? (electrodo) fase
heterogénea
lacasaox ABTS? lacasa ABTS2 (disolución)
fase homogénea (LENTA)
ABTS ? ABTS2 e?
Einicial 0.9 V
Aumenta la cantidad de ABTS2 y por tanto las
corrientes de reducción.
16ABTS 0.2 m lacasa 10 U/ml v 0.02 Vs-1
Ei 0.9 V 10 s
17Conclusiones
Se ha simulado por vía electroquímica el
sistema lacasa-mediador con cuatro de los cinco
mediadores caracterizados previamente, frente a
la oxidación de compuestos modelo de lignina y de
lignina
Tres de ellos muestran actividad catalítica en
el orden ácido violúrico lt acetosingona lt ABTS
(II), mientras que el catecol no resultó reactivo.
Aunque la reacción entre las lacasas y los
mediadores suele ser relativamente lenta, se ha
probado por vía electroquímica la reactividad de
nuestra lacasa frente al ABTS, demostrándose que
es capaz de oxidarlo al dicatión, como se ve por
el aumento que experimenta la corriente de
reducción.
18Escobar Pacheco Nayra a, Gallego Torres Jaime a,
González-Barreda Naranjo Pilar a, González Arbola
Katy b, León González Francisco Oliver a, Méndez
Herrera Elisa a, Mujica Pérez Ruyman a, Nieves
Cedrés Maday a, Pérez Miranda Digna aTutores
Dra. M.C. Arévaloa y Dr. M. A. Falcónba Facultad
de Química, Licenciatura en Química, Curso 5º,
Química Físicab Facultad de Farmacia, Doctorado
en Ciencias de la Vida, Microbiología