Clase 2

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Microbiología

• Clase 2
• Fisiología bacteriana
• Bioq. Denise Risnik (drisnik_at_hotmail.com)

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Fisiología bacteriana
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Célula eucariota
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Célula procariota
5
Flagelos
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Fimbrias y Pili sexual
7
Comparación
8
Comparación
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taxonomía

• Taxonomía ? Clasifica los organismos
  jerárquicamente en grupos (taxones) especie,
  genero, familia, orden, reino
• Los nombres científicos de procariotas está
  regulado por el International Code of
  Nomenclature of Bacteria
• NOMENCLATURA BINARIA Toda especie se nombra por
  dos palabras el género al que pertenece y nombre
  propio de la especie. Por ejemplo Drosóphila
  melanogaster, Drosóphila pseudoscura son dos
  especies distintas de moscas pertenecientes a un
  mismo género Drosophilae.

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Categorías taxonómicas
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Categorías taxonómicas
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Taxonomía
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Envoltura externa
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Tinción de Gram
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Tinción de Gram
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Composición elemental de E. coli
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Factores de crecimiento

• Compuestos orgánicos requeridos en muy pequeñas
  cantidades por algunas células, porque son
  incapaces de sintetizarlos
• -Aminoácidos
• -Vitaminas
• -Purinas
• -Pirimidinas

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Grupos térmicos
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Comportamiento frente al oxigeno
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Metabolismo

• Es la suma de todos los procesos químicos que
  ocurren en un organismo.
• La producción de energía está asociada a
  reacciones de oxido/reducción y se acumula en
  compuestos químicos con enlaces de alta energía,
  de los cuales el principal es el ATP.
• Catabolismo conjunto de procesos químicos
  celulares que liberan energía. Anabolismo
  conjunto de procesos químicos celulares que
  utilizan energía.

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Rol del ATP

• Acoplamiento entre metabolismo productor de
  energía y biosíntesis.

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Fermentación

• El término fermentación, en su acepción estricta,
  se refiere a la obtención de energía en ausencia
  de oxígeno y generalmente lleva agregado el
  nombre del producto final de la reacción.
• CARACTERÍSTICAS- fosforilación a nivel de
  sustrato (citoplasma)- no necesita cadena de
  transporte de electrones (CTE)- utiliza como
  aceptor final de electrones una molécula
  orgánica.- El ATP se forma por donación de ATP
  de un fosfato de alta energía a partir de un
  producto intermedio fosforilado.

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Fermentación láctica y fermentación alcohólica
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Fermentación de la lactosa

• Reacciones de identificación
• Medio diferencial EMB Levine

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Quienes fermentan?

• Bacterias
• Anaerobias estrictas
• Anaerobias aerotolerantes
• Anaerobias facultativas (frente a la ausencia de
  oxigeno)

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Respiración

• CARACTERISTICAS - fosforilación oxidativa ( ADP
  P - ATP)- Requieren una cadena de transporte
  de electrones- Pueden ocurrir en presencia de
  oxígeno (respiración aeróbica) o en su ausencia
  (respiración anaeróbica).- Tiene como aceptor
  final de electrones un compuesto
  inorgánicoRESPIRACION AEROBICA- El aceptor de
  electrones es el oxígeno.- Utiliza la cadena de
  transporte de electrones para generar un
  gradiente de protones imprescindible para que las
  ATPsintasas formen ATP.RESPIRACION ANAEROBICA
• -el aceptor final de electrones es otro
  compuesto inorgánico como nitrato, sulfato,
  carbonato, Fe III, etc (por ej. Pseudomonas o
  Bacillus )

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Respiración

• Aeróbica
• -Bacterias aerobias
• -Bacterias anaerobias facultativas (cuando hay
  oxigeno)
• Anaeróbica
• -Anaerobias estrictas (carbonatos y sulfatos como
  aceptores finales)
• -Anaerobias facultativas (cuando no hay oxigeno y
  tienen como aceptor final nitratos).

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Respiración vs. Fermentación
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Fisiología bacteriana
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Reproducción asexual
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Recuento de viables en placa

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• Recreo!!

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Bacterias anaerobias de interés clínico

• Características
• No requieren de oxigeno como aceptor final de
  electrones para obtener energía
• Carecen de citocromos
• No desarrollan en aerobiosis o microaerofilia (el
  oxigeno y sus derivados son TOXICOS
• La flora endógena es el principal reservorio de
  bacterias anaerobias (Orofaringe,
  gastrointestinal, genitourinaria y en piel)
• Agentes infecciosos exógenos C. perfringens , C.
  novyi A
• La mayoría de las veces se presentan como
  infecciones mixtas polimicrobianas.

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Muestras

• Olor fétido
• Purulenta
• Necrosis tisular
• Polimicrobiana
• Flora endógena
• Se ven MO en el Gram pero no crecen en aerobiosis
• Debe tomarse la muestra evitando la contaminación
  con flora normal

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Cultivo de anaerobios

• Medios suplementados con hemina y vitamina K
• Atmosfera anaerobia(85-90 N2, 5-10 H2 5-10
  CO2)
• 48 hs mínimo y hasta 7 días para Actinomyces y
  Porphyromonas spp. (cavidad oral)

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Cultivo anaerobio
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Clostridium

• Anaeróbicos estrictos ? fermentan
• Viven en suelos sin O2 o tracto gastrointestinal.
  
• Forman endosporas.
• Causan enfermedades ante algún factor
  desencadenante, como heridas
• Patologías
• botulismo (C. botulinum)
• tétanos (C. tetani)
• ? gangrena gaseosa (C. perfringens)
• Toxina botulínica ? A, B toxina se fija a
  terminal presináptico de unión neuromuscular ?
  parálisis flácida.
• Toxina del tétanos ? parálisis espástica,
  convulsiva.

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C. perfringens

• ? gastroenteritis
• Al igual que C. Botulinum es esporulante ?
  Sobrevive a la cocción y envasado (donde crece
  anaeróbicamente) ? en intestino las esporas
  germinan y producen enterotoxina que altera
  permeabilidad de epitelio intestinal provocando
  diarrea.
• Diagnóstico ? ELISA a partir de heces
• ? cultivo en agar sangre ? zona de
  hemólisis (la toxina disuelve lípidos de membrana
  provocando lisis.
• Es el patógeno más frecuente en muestras clínicas
  (no fecales). Típicamente aparece en heridas. ?
  la anoxia de las heridas (provocada por las
  hemorragias favorece crecimiento de anaerobios.
• Producen diferentes toxinas (las más común en el
  hombre es la A) , que rompen lípidos de las
  membranas celulares. Por eso son necrotizantes y
  hemolíticas.
• Suele estar presente en alimentos envasados
  (medio anaerobio). ? dolores abdominales
  (gangrena gaseosa).

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Mycobacterias

• Bacilos acido alcohol resistentes (Ziehl-Neelsen)
• Aerobios estrictos
• Inmóviles
• No flagelados
• No esporulados
• No encapsulados
• Pared celular con ácidos micolicos
• 54 especies
• M. leprae y M. tuberculosis (patógenos obligados)
• Crecimiento lento, se guarda el cultivo hasta 60
  días

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Ziehl Neelsen

• Tinción para bacterias acido alcohol resistentes
• Principal uso Detección de Mycobacterium
  tuberculosis (agente causal de la tuberculosis)

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(No Transcript)
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Tuberculosis

• Causada por M. tuberculosis o por M. bovis
• Puede causar enfermedad en cualquier órgano del
  cuerpo, siendo lo más frecuente la infección en
  los pulmones, desde donde se disemina a otros
  órganos por vía sanguínea o linfática. Los
  síntomas aparecen cuando las lesiones son ya muy
  extensas, de forma que el diagnóstico se
  establece cuando la enfermedad está muy avanzada.
  
• Provocan lesiones tisulares (tubérculos) ? En
  pulmones genera hipersensibilidad retardada ?
  inflamación crónica por reclutamiento de
  leucocitos del sistema inmune ? diagnóstico
  test de tuberculina se inyecta intradérmicamente
  a paciente ? si produce un edema ? la persona
  desarrolló hipersensibilidad al patógeno.

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Mycobacterium leprae

• Causa Lepra enfermedad infecto-contagiosa,
  crónica que puede afectar todos los órganos en
  especial piel y sistema nervioso.
• Lesión cutánea única o múltiple
• Perdida de sensibilidad térmica, dolorosa y/o al
  tacto
• Incubación de 5 años y hasta 20 años asintomático
• Diagnostico médico
• Laboratorio clasifica y sigue tratamiento
• Nunca ha podido ser multiplicado exitosamente en
  un medio de cultivo artificial.

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Chlamydias

• Bacterias intracelulares obligadas
• Chlamydia trachomatis (varios serotipos)
• Dependiendo del serotipo produce Tracoma ocular
  (inflamación crónica que termina en ceguera),
  infecciones genitales, oculares y neumonías
  neonatales y Linfogranuloma Venéreo (ETS)
• Chlamydia pneumoniae infección asintomática,
  infecciones respiratorias (faringitis, sinusitis,
  otitis media, bronquitis media), endocarditis,
  miocarditis, meningoencefalitis.

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Diagnostico

• Cultivo en líneas celulares susceptibles
• Detección de antígenos (IFD, ELISA)
• Detección de ácidos nucleídos (PCR)

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Espiroquetas

• PHYLUM ESPIROQUETAS
• Géneros
• Spirochaeta
• Treponema
• Cristipira
• Leptospira
• Borrelia
• Gram
• Móviles
• Algunos patógenos ? sífilis,

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Sífilis

• Enfermedad de transmisión sexual, vertical,
  parenteral y accidental
• Cuadro clínico complejo con evolución crónica y
  etapas de agudización
• Complicaciones Neurosífilis y coinfección con
  HIV
• Agente causal Treponema pallidum subespecie
  pallidum
• Sensible a la penicilina
• No se puede cultivar ni ver al microscopio óptico
• Normalmente infección local (formando chancro),
  pero puede esparcirse a mucosas, ojos, tejido
  conectivo o sist. nervioso.

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Diagnostico

• Directo
• Campo oscuro
• Tinción argéntica
• IFD
• PCR
• Indirecto (Anticuerpos)
• -VDRL
• -EIA
• -TPHA

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Leptospirosis

• Leptospira
• Aerobias estrictas ? usan ácidos grasos.
• Leptospirosis ? en riñón fallo renal y muerte.
• Entran por lesiones en la piel y luego se
  asientan
• Diagnóstico
• -Campo oscuro
• -Tinción argentica
• -Inmunofluorescencia
• -Medios de cultivo especiales
• -PCR

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Leptospirosis
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• Bibliografía
• Microbiología biomédica. Basualdo
• Microbiología. Brock
• Muchas Gracias!!