Tellen en differentieren van WBC in liquor met de LH 750

1
Tellen en differentieren van WBC in liquor met de
LH 750

• Dr G.J.J. Beukeveld

2
Leukocytendiff in Liquor met de LH 750

• Klinische relevantie
• Differentiatie
• LH-750 instellingen
• Metingen
• Resultaten
• Conclusie

3
Klinische relevantie

• Meningitis is de ontsteking van de meninges

• Meninges zijn de membranen rond de hersenen en
  ruggenmerg

• Ontsteking door virus of bacterie

• Virale ontsteking geneest vanzelf zonder
  restschade

• Bacteriële infectie leidt tot hersenschade,
  leerproblemen, gehoorverlies of de dood.

4
Meningitis

• 12.500 gevallen virale meningitis in US/jaar
• 25.000 gevallen van bacteriële meningitis
• 2.200 mensen per jaar overlijden hieraan.

• 100 personen per jaar in Nederland

5
(No Transcript)
6
(No Transcript)
7
Schimmels, tuberculose en chemicaliën
8
Typen WBC bij meningitis

• Abces mixed glucose n
• Bacterieel neutrofielen glucose
• Viraal lymfocyten glucose n
• Schimmel lymfocyten glucose
• Tuberculose lymfocyten glucose
• Neurosyphilis lymfocyten glucose n
• Parasieten lymfocyten glucose n of

9
Typen WBC bij meningitis

• Abces mixed glucose n
• Bacterieel neutrofielen glucose
• Viraal lymfocyten glucose n
• Schimmel lymfocyten glucose
• Tuberculose lymfocyten glucose
• Neurosyphilis lymfocyten glucose n
• Parasieten lymfocyten glucose n of

10
Meningitis

• Snel onderscheid maken tussen
• bacteriële (neutrofielen in liquor)
• en
• de anderen (lymfocyten in liquor)
• Pas op bij een beginnende bacteriële meningitis
  kunnen eerst de lymfocyten verhoogd zijn!

11
Uitdaging Klinisch Chemisch Laboratorium

• In liquor
• snel én betrouwbaar leukocyten tellen en
  differentiëren.
• 24 uur per dag
• 7 dagen in de week
• door alle dienstdoende analisten

Kan dat in het CITO pakket én met routine
apparatuur?
JA
12
LH-750 hematologie analyzer

• CBC mode (counting blood cells)
• WBC mode (white bloodcell counting)
• Retic mode

WBC via volume, vorm en inhoud (drie dimensioneel)
Body Fluid mode
Body Fluid mode is de CBC mode met software om
extra gevoelig te tellen.
Body Fluid mode en WBC mode gaan nog niet samen
Body Fluid mode geen differentiatie mogelijk
(twee metingen?)
13
CBC instellingen op de LH 750 en het LIS
LH-750 in de normale CBC mode

• 0,1 oo o 109/l LIS 0,1
• 0,01 o o 109/l LIS 0,1

10,0 /ul LIS 10,0
Bij liquor-differentiatie geen instellingen
veranderen De gevoeligheid blijft een probleem
14
Liquordiff op de LH 750
De LH 750 heeft problemen met de allocatie van de
WBC!
15
Liquordiff op de LH 750
Met plasma 50 v/v
16
WBC in liquor met en zonder plasma
Met plasma (50 v/v)
Zonder plasma
17
Robustheid
Plasma 50 v/v
18
Afkapwaarde
19
Afkapwaarde
Verdunning WBC telling LH 750 is 251 keer Nodig
28 ul voor de differentiatie. Bij 30 cellen/ul
worden meer dan 500 cellen gedifferentieerd.
(30 28 is 840) De telkamer telt dan
totaal 90 cellen.
20
Interne variatie

• Leuko Neutro Lymfo Neut

Gemid. 314 233
56 74,5 S.D.
7,0 4,8 9,7
2,5 V.C. 2,2
2,1 17,2
3,3
21
Carry over

• Na blanco is de absolute carry over lt 0,9
• (9000 cellen/ul)

22
Resultaten patienten

• 50 liquoren onderzocht
• 45 negatief
• in de telkamer lt 5 cellen/ul
• LH 750 uitslag lt 0,03 109/l
• PA Lab. alles bloedcellenarm
• 5 positief (allen neutrofielen als
  hoofdcomponent)

23
Positieve patiënt
50 plasma v/v
Telkamer 9600 cellen/µl
24
Patiënt 1
25
Praktijk

• Minimaal 1 ml liquor
• 500 ul voor de telkamer, uitslag naar LIS
• 500 ul centrifugeren (5 min bij 950 g)
• 400 ul afpitteren (naar de Chemie)
• 400 ul AB plasma erbij en mengen
• Blanco meting op de handmethode
• Een of twee maal meten op de LH 750
• Bij uitslag leukocyten gt 0,03 diff naar LIS

Liquor hoeft niet meer CITO naar PA laboratorium
26
Conclusie

• Liquoren met verhoogde bloedcellen zijn
  routinematig
• in de WBC mode op de LH 750 te meten.
• Daarvoor de bloedcellen in plasma oplossen
• Vooraf een blanco run.
• Vanaf 30 cellen/ul is betrouwbare differentiatie
  mogelijk.
• Een Cytospin voor de WBC diff is dan niet nodig
• Body Fluid mode gekoppeld met de WBC mode kan de
  detectielimiet verlagen.
• Dit dient nader te worden onderzocht

27
Met dank aan

• Danny de Busser
• Henny Heijnen
• Martin Kan
• Barbara Leen
• Jan van Rijn
• Jolanda Werkhoven-Crezee