Genetic Screening and Prenatal Diagnosis for

1
? ? ? ??????????????? Genetic Screening and
Prenatal Diagnosis for ? and ? thalassemia in
Guangdong Meizhou 2006, December
07 ??? ??????,???????? ?????????????????? Souther
n Medical University
2
????
????????? ?????? 1 23
???????????????????
3
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?? 8.53 2.54
?? 14.95 6.78
?? 1.92 2.18
?? 4.72
?? 4.20 1.10
?? 5.02 3.41
4
?
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????????????????????
Journal of Clinical Pathology, 2004
57(5)517-22.
5
???????????????
???? Allele ?
? ????? 478 8.53
(--SEA) Deletion 232 4.14
(-a3.7) Deletion 174 3.10
(-a4.2) Deletion 53 0.95
(-aCS) Mutation 10 0.18
(--THAI) Deletion 2 0.04
(-aQS) Mutation 2 0.04
(--11.1) Deletion 1 0.02
?2CD118(TCA) 1 0.02
?-?-gene deletion 1 0.02
Undetermined 2 0.04
6
??????ß????????
???? Allele ?
ß????? 198 2.54
Deletion of CTTT at codons 41-42 72 0.92
C?T at position 654 in IVS2 48 0.62
A?G at nucleotide -28 33 0.42
G?A at codon 26 10 0.13
A?T at codon 17 8 0.09
Insertion of A at codons 71-72 7 0.09
G?T at codon 43 7 0.09
A?G at nucleotide -29 4 0.05
Insertion of A at codons 27-28 4 0.05
?-gene deletion 1 0.01
Undetermined 3 0.06
7
?????????????(95CI) ? ??????ß?? 645
(480,835) ? Barts???????1714 (1498,1945)
? ????(Hb)H ? 1677 (1467,1901)
8
????????????? (1998-2001)
?? ?????? ?? ???? (/10,0 00)
1 ?????? 260 19.66
2 ????? 208 15.73
3 ?? 200 15.12
4 ???? 111 8.39
5 ?? / ?? 109 8.24
9
???????????? ? ??????????? ? ?????????? ?
???????
????????????
????? ? ???1???? ? ?????????????? ?
??????????,????
10
????
?????????? ? ????????????????????? ?
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11
????? ????????? ? ??????????? ?
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12
????????????????????
? ??1993.01.01 2003.12.31 ? ?????????
??????? ???????? 1 / 17 ? ????????? ?
???????????????

13
??????????????
14
????
15
??????????
?????? ? ? ? ? ? ?? ?? ?? ??
Hb E 46 3 49 0.91
Hb H 21 2 23 0.43
Hb CS 15 3 18 0.34
Hb G 14 1 15 0.28
Hb Q 13 2 15 0.28
Hb N 12 1 13 0.24
Hb D 10 1 11 0.20
HB New York 8 0 8 0.15
Total 139 13 152 2.83
16
??????? 1993-2003 ???????
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1993 3989 68393 350 232 (5.8) 129 (3.2) 13 (3.7) 8 (2.3) 10 (2.9) 12 (92.3) 7 (87.5)
1994 4564 71617 421 265 (5.8) 164 (3.6) 18 (4.3) 8 (1.9) 9 (2.1) 16 (88.9) 8 (100)
1995 3902 71751 361 227 (5.8) 142 (3.6) 17 (4.7) 7 (1.9) 12 (3.3) 15 (88.2) 7 (100)
1996 4994 74460 464 285 (5.7) 181 (3.6) 19 (4.1) 8 (1.7) 12 (2.6) 17 (89.5) 8 (100)
1997 4392 71989 401 250 (5.7) 158 (3.6) 21 (5.2) 7 (1.7) 10 (2.5) 18 (85.7) 7 (100)
1998 4532 75378 425 263 (5.8) 172 (3.8) 17 (4.0) 8 (1.9) 12 (2.8) 17 (100) 8 (100)
1999 5016 80141 465 285 (5.7) 186 (3.7) 24 (5.2) 8 (1.7) 14 (3.0) 23 (95.8) 8 (100)
17
( contd )
?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ????? ? ? ? ? ? ? ? ?
?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? ?? ?? ??? ?? ??? ??? ??? a?? () ß?? () a?? () ß?? () a/ß ??() a?? () ß?? ()
2000 4492 81817 418 256 (5.7) 172 (3.8) 21 (5.0) 7 (1.7) 16 (3.8) 21 (100) 7 (100)
2001 4521 80152 411 254 (5.6) 164 (3.6) 17 (4.1) 8 (1.9) 12 (2.9) 17 (100) 8 (100)
2002 4695 80667 415 260 (5.6) 163 (3.4) 16 (3.9) 8 (1.9) 11 (2.7) 16 (100) 8 (100)
2003 4124 86393 372 227 (5.5) 152 (3.6) 15 (4.0) 6 (1.6) 13 (3.5) 15 (100) 6 (100)
Total 49221 860758 49221 860758 4503 2804 (5.7) 1783 (3.6) 198 (4.4) 83 (1.8) 131 (2.9) 187 (95.8) 82 (98.8)
18
????187 ? ??? 82? ß??
2804 1783 198? 83?
54?Barts????Hb H?
Total of 4503 couples screened
18???ß??
?????????????? ? ??1 ß??
??? ß?? 5.7 3.6
4.4 1.8
??????? 1993-2003 ???????
19
??????
20
??????????
? ?????? ? DNA???? ?-?????
?-?????
21
???? (amniocentesis) ?????????
22
DNA????
? ??PCR (multiplex PCR) ? ??????????????(ASO) ?
????? (RDB) ? ????????(DHPLC) ?
??????DHPLC(multiplex PE / DHPLC)
23
?? a? ß????????? (1993-2003 )
?? ?????? ? ? ? ? ? ? a?? ß?? ?? PNDs
1993 2003 ????? 126 126
1999 2003 ???? (DNA Gap-PCR) 61 61
1993.11993.12 DNA ASO ?? 7 7
1994 2002 DNA ????? 70 70
2003.12003.12 PE / DHPLC 6 6
24
Diagnosis Patient 1 Barts hydrops
fetalis Patient 2 Hb H disease Patient 3 ?
thal trait
?????????????
25
???????????
???? ????
Gap-PCR a??????
RDB a??/ß??
???DHPLC a??/ß??
SBE/FP ß??????
PE/DHPLC ß??5?????
?-?ELISA assay a????SEA????
26
(No Transcript)
27
??Gap-PCR??--SEAa???????????
28
--SEAa???????????
29
(No Transcript)
30
??????UBI????????
31
(No Transcript)
32
EXON 1
IVS 1
EXON 2
EXON 3
IVS 2
????ß????????????
33
DHPLC ???ß????? ??PCR????
IVS2
3 UTR
A
C
B
? Fragment size A 453 bp
B 364 bp
C 423 bp ? One set of
PCR conditions
34
DHPLC??? ???? ? ?????( 50 ?C )
??DNA???? ? ?????( 52-78 ?C )
???? ? ?????( 78-80 ?C )
Oligo?RNA??
35
PCR????????( 52-78 ?C )
Reference Samples
Wild type Mutant Heteroduplexes Homoduplexes
PCR Products
36
(No Transcript)
37
DHPLC ??ß???????
38
DHPLC ??ß???????
39
DHPLC ??ß???????
40
Genotype Father CDs41-42 (?CTTT) / N
Mother IVS-2-654 (C?T) / N Fetus CDs41-42 /
IVS-2-654 Normal control N / N

RDB analysis application to rapid prenatal
diagnosis for eight ßthalassaemia mutations.
41
83 ? ? ?????????????
???? ??? ??
?? ? 30
??? (total) 35
CDs 41-42 (?TCTT) / N 14
IVS-2-654 (CgtT) / N 8
-28 (AgtG) / N 5
CD17 (AgtT) / N 3
CD26 (GgtA) / N 2
-29 (AgtG) / N 1
CDs27-28 (C) / N 1
Unknown / N or Normal 1
42
( contd )
???? ??? ?? ??
?????????
(??) 18
CDs 41-42 (?TCTT) / IVS-2-654 (CgtT) CDs 41-42 (?TCTT) / IVS-2-654 (CgtT) 6
CDs 41-42 (?TCTT) / -28 (AgtG) CDs 41-42 (?TCTT) / -28 (AgtG) 4
CDs 41-42 (?TCTT) / CD17 (AgtT) CDs 41-42 (?TCTT) / CD17 (AgtT) 2
IVS-2-654 (CgtT) / CD17 (AgtT) IVS-2-654 (CgtT) / CD17 (AgtT) 2
CDs 41-42 (?TCTT) / CDs 41-42 (?TCTT) CDs 41-42 (?TCTT) / CDs 41-42 (?TCTT) 1
CDs 41-42 (?TCTT) / CDs 27-28 (C) CDs 41-42 (?TCTT) / CDs 27-28 (C) 1
IVS-2-654 (CgtT) / CDs 71-72 (A) IVS-2-654 (CgtT) / CDs 71-72 (A) 1
IVS-2-654(CgtT) / CD43 (GgtT) IVS-2-654(CgtT) / CD43 (GgtT) 1
?? 83
43
266 ?????????????
???? ?????? a?? ß?? ?????? a?? ß?? ?????? a?? ß?? ?? ()
?? 41 30 69 (25.6) 69 (25.6)
??? 92 35 125 (46.3) 125 (46.3)
???? 54 18 72 (26.7) 72 (26.7)
???? 2 1 3 (1.11) 3 (1.11)
?? 0 0 0.0 0.0
??() 187 (69.3) 83 (30.7) 270 (100) 270 (100)
Three Hb H disease involved
44
(No Transcript)
45
269 (95.7) ???????? ? 187 ??? ? 83
ß??(1???)
12 ?????????
2??????
72(26.7) ???????? ? 54 ????? ? 18
??ß??(1???)
197???????
3 ?HbH???
69 ??????? ? 51 ??? ? 18
??ß??(1???)
46
?????ß??????????? ????????
??2001.1-2005.12 ?? 40? ??
???2006???????? ???????????
47

• ???????????????
• ?????????????,?????
• ???????????????????
• ???????????????????
• ??????
• 2.?????????????,?????
• ??????,?????,???????
• ???????

48
( contd )
3.???????????,???????? ??????????????? 4.??????
????????????? ??????????????????? ???
49
??
? ??????????????????? ????????a?ß?????? ?
??????????????????? ???????? a?ß????????
50
(No Transcript)