Tumores e Transplantes

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Tumores e Transplantes
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Histologia Tumoral

• Celula Tumoral- aquela na qual há um
  desiquilíbrio na proliferação e diferenciação, a
  favor da primeira. Segundo Burnet ( 1970/71)
  sabemos que o sistema imune tem um papel
  preponderante ontra o crescimento de células
  neoplásicas teoria da imunovigilância- o que
  pressupõem que as células tumorais possuem
  antigénios que não estão presentes nas células
  normais, sendo reconhecidas.
• O tumor forma-se ,então, quando algumas destas
  células escapam à vigilância do SI e crescem de
  maneira ilimitada

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Histologia Tumoral

• Tumores sólidos removidos cirurgicamente são
  frequentemente caracterizados por um infiltrado
  celular heterogéneo de fagócitos mononucleares
  linfócitos, plasmócitos e mastócitos sugere uma
  resposta imunológica específica.
• Em individuos portadores de tumor encontram-se
  imunoglobulinas com capacidade antitumoral e
  linfócitos T citotóxicos, sensibilizados para o
  mesmo
• Provas contrárias á Teoria de Vigilância do SI-
  caso de ratinhos Nude que apesar de não terem
  células T, não tem uma alta incidência de
  tumores.

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Tipos de TumoresTumores podem ser induzidos
experimentalmente por exposição a viroses
oncogénicas, substâncias tóxicas ou
espontâneamente em pessoas de idade.

• Patogenia Víral - cancro
• HBV carcinoma hepatocelular
• CMV Sindroma de Kaposi
• HTLV leucemias T
• HPV carcinoma cervical

• Propriedades da célula tumoral
• antigenicidade
• velocidade de crescimento
• resposta a hormonas
• resposta a drogas citotóxicas
• anormalidades cariotípicas
• capacidade de invasão-metastases

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Tipos de Tumores

• Tumor ou neoplasma- clone celular de crescimento
  anormal- desregulação no processo de maturação e
  morte celular. O tumor pode ser benigno ( não
  cresce indefinidamente e não invade
  extensivamente o tecido saudável que o rodeia) ou
  maligno ( cresce progressivamente e é do tipo
  invasivo).
• Os tumores malignos podem exibir metastases-
  pequenos clusters de cél. cancerígenas que se
  desagregam do tumor e invadem o sangue ou linfa
  sendo levados para outros tecidos onde
  proliferam.
• Os tumores malignos são classificados conforme a
  sua origem
• carcinomas advém do tecido endo ou ectodermal
• leucemias e linfomas tumores das células
  hematopoieticas da MO
• sarcomas advém de tecido conectivo mesodérmico

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Tipos de Tumores
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Tumores e genética

• No tecido normal, a homeostase é conseguida por
  um balanço entre a proliferação celular e a morte
  celular se há um desiquilíbrio em qualquer
  estado de proliferação celular então
  desenvolve-se o cancro.
• Oncogenes (ou genes cancerígenos- que codificam
  para uma proteína capaz de induzir transformação
  celular) têm um papel importante neste
  equilíbrio, daí poderem ser associados em 3
  categorias que reflectem as suas actividades
• I- Genes que induzem a proliferação celular
• II- Genes supressores tumorais, que inibem a
  proliferaçaõ celular
• III- Genes que regulam a morte celular programada
• Mas de onde vêm os oncogenes?

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Tumores e genética

• A conversão de proto-oncogenes em oncogenes pode
  envolver mutações, resultando na produção de
  produtos genéticos diferentes ou
  amplificação/translocação de DNA, resultando na
  produção crescente ou decrescente de produtos
  genéticos.
• Normal cells
  Transformed cells
• 
  Viral oncogenes
• Retroviral transduction
• Proto-oncogenes
• Mutagens, viruses,
• Radiation and gene
• Predisposition
• 
  Celular oncogenes

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Antigénios Tumorais

• Um grande número de propriedades distinguem as
  células tumorais das normais, como a capacidade
  invasiva, perda de crescimento por inibição de
  contacto e também diferenças qualitativas e
  quantitativas nos seus antigénios.
• Estes antigénios podem ser divididos em
• TSA ( Tumor specific antigens) - únicos á
  célula tumoral e possuem os chamados
  neoepítopes, capazes de reconhecimento pelas
  CTLs.
• TATAs ( Tumor associated transplantation
  antigens) - aqueles também encontrados em
  células normais
• Outra classificação destes antigénios pode ser
  feita baseada na sua natureza, incluindo
  antigénios virais, químicos, oncofetais e
  antigénios de diferenciação
• Antigénios Virais - DNA e RNA viral oncogénico
  codificam para antigénios virais expressos pelo
  tumor e induzidos por virus

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Antigénios Tumorais

• Antigénios oncofetais - Associados á superfície
  celular tumoral estes antigénios não são únicos
  ás células tumorais são também encontrados em
  células durante o desenvolvimento embriogénico e
  no soro normal humano a níveis muito baixos. São
  genes silenciosos que sofrem reativação durante
  a transformação tumoral
• CEA ( carcinoembryonic antigen)
• AFP ( alpha-fetoprotein)
• Estes antigénios oncofetais não são considerados
  TSA uma vez que altos níveis na sua concentração
  podem resultar de doenças não- neoplásicas,
  incluindo doença inflamatória crónica intestinal
  ou cirrose hepática.

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Antigénios Tumorais

• Antigénios de diferenciação- alguns antigénios
  normais são expressos em estados específicos de
  diferenciação celular estes antigénios podem
  também ser encontrados em células tumorais e
  detectados com o uso de mAbs. Uma vez que a maior
  parte dos tumores resultam da expansão de uma
  única célula que a certa altura pára de se
  diferenciar, os mAbs são também usados para
  determinar o estado aproximado de diferenciação
  em que a malignidade ocorreu apropriada
  classificação e terapia
• EX
• leucemias T derivadas de timócitos ou
  pró-timócitos
• leucemias B derivadas de estado pré-B

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Proteínas Oncogénicas

• Os produtos de oncogenes ou genes mutados podem
  também constituir antigénios específicos do
  tumor
• -p53
• -ras
• P210 BCR-ABL

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Reconhecimento dos Tumorespelo SIO sistema
imune reconhece os antigénios através dos TRA
(Tumor rejection antigens)

• Antigénios TSA
• Aparecem normalmente em cél. germinais masculinas
• Ag fortemente expressos nas cél. tumorais
• proteínas codificadas por oncogenes virais
• proteínas fortemente expressas em comparação com
  cél.normais

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Resposta do SI a Tumores

• Anticorpos monoclonais contra subsets T,
  monocitos/macrófagos e células NK podem
  determinar subpopulações no local do tumor e a
  sua distribuição micro-anatómica
• O nosso SI vigia constantemente o aparecimento de
  células neoplásicas e destroi-as e para tal conta
  com as células NK e reconhecimento do MHC por um
  lado alguns tumores não expressam MHC Classe I
  enquanto que outros expressam antigénios Classe
  II - o SI no 1º caso não pode recorrer ás células
  citotóxicas TCD8 , mas pelo menos usar as T
  helper CD4. A resposta do SI pode ser de 2
  tipos
• CELULAR
  HUMORAL

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Resposta celular

• A activação T inclui a geração de linfócitos Th,
  Tc e Ts os linfócitos T citotóxicos reconhecem
  os antigénios tumorais em associação com MHC
  Classe I. A activação também leva á produção de
  citoquinas pelas Th das quais se destacam
• IL-2 (divisão T e diferenciação B em células
  plasmáticas NK)
• MIF -migration inhibition factor- (activação de
  macrófagos)
• Macrophage activating factor
• Factores quimiotáticos
• Factores mitogénicos (MFs)
• Linfotoxina ( lise tumoral celular in situ)
• IFNs

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Resposta celularA resposta adaptativa celular T
pode ser detectada através de 2 tipos major de
testes proliferação e função efectora.
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Resposta celular

• Para além da resposta linfocitária T
  consideram-se aínda 2 tipos de células com acção
  anti-tumoral
• NK Matam as células tumorais que não expressam
  MHC Classe I- o reconhecimento NK não é
  específico, é feito por receptores Fc á sua
  superfície ( são as máis importantes células de
  vigilância do SI.
• Macrófagos - Células tumorais opsonizadas podem
  ser mortas por macrófagos e PMNs, mediante
  fagocitose ( receptores Fc) e/ou por ADCC (
  implica activação de complemento)

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Tumores e imunidade inata

• Os tumores mesmo perdendo a capacidade de
  expressão de MHC I ficam susceptíveis ao ataque
  das células NK

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Resposta humoral

• A produção de anticorpos contra antigénios
  tumorais pode ser demonstrada por técnicas de
  imunofluorescência e embora as reacções celulares
  sejam mais significativas, detecta-se a produção
  de anticorpos que podem aderir á superfície
  tumoral e lisar as células por
• activação de complemento
• activação de ADCC
• formação de imunocomplexos
• fagocitose pelos macrófagos e PMNs, mediada por
  eles

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Citoquinas

• Havendo ou não resposta celular e humoral é
  determinante a produção de citoquinas,
  nomeadamente de TNF-a, pelos fagócitos com
  actividade directa anti-tumoral.
• No processo dessa activação fagocitária e também
  das NK, a citoquina-chave é o IFN-?, que para
  além desta acção potencia o efeito dos fagócitos
  e NK e activa os linfócitos T citotóxicos.
• A IL-2, produzida pelos Linfócitos T helper
  activa paracrinamente os linfócitos T
  citotóxicos.
• Para além disso já foi observado que a
  administração de altas doses de IL-2 em pacientes
  com cancro renal ou melanoma maligno avançado,
  levava á remissão parcial ou completa.

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Mecanismos Tumorais de Escape ao SI

• 1 -fraca imunogenicidade tumoral
• 2-modulação da expressão antigénica HLA
• 3-imunossupressão tumoral
• Lib.Ag tumorais
• Lib. TGF-ß
• Ab não citotóxicos
• Altr.estrutural e funcional do TCR
• Promv. anergia

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Mecanismos Tumorais de Escape ao SIA capacidade
do tumor escapar ao controlo imunológico pode
depender do balanço entre a eficácia do SI e os
factores que promovem o seu escape

• factores genéticos
• imunidade natural
• imunidade adaptativa
• destruição tumoral

• produtos tumorais
• factores genéticos
• modulação antigénica
• cinética tumoral
• disfunção imune
• tolerância local
• tolerância sistémica
• factores bloqueadores
• crescimento tumoral

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Imunoterapia Tumoral

• As formas habituais e clássicas de tratamento
  radioterapia, quimioterapia e mesmo cirurgia são
  muitas vezes insuficientes para combater o avanço
  de metástases.
• O objectivo da imunoterapia tumoral é a remoção
  das células malignas sem danificar as células do
  hospedeiro
• Actualmente recorre-se a métodos não clássicos de
  terapia, alguns dos quais, aínda em investigação

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Imunoterapia Tumoral

• com anticorpos
• Ab monoclonais contra Ag tumorais
• Imunotoxinas
• Ab acoplados a radioisotopos
• Ab acoplados a drogas quimioterapêuticas

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Imunoterapia Tumoral

• Com citoquinas
• Imunoestimulação não específica induzida por
  citoquinas produz células efectoras embora seja
  necessária a conjução com outro tipo de
  imunoterapia
• Activação das LAK após cultura in vitro com IL-2
  e infusão no paciente
• Activação dos TILs, células TCD8 tratadas como
  as LAK e depois infusionadas novamente no
  paciente
• Activação MAK, isolando monócitos do sangue
  periférico do doente com o tumor, cultivando-os
  in vitro e reinjectando-os após activação

• Com vacinas
• Imunização tumoral ou com antigénios tumorais, em
  que os TAAs são mortos ou irradiados ( as células
  in vitro) e depois de imuniza o paciente-
  inclusivé DNA dos TAAs em teste
• Imunização com tumores transfectados, cuja
  capacidade imunogénica e co-estimulatória é maior
  na indução de uma resposta CTL
• Imunização com APCs sensitizadas com TAAs, usando
  por ex. células dendríticas, apresentando os
  antigénios in vitro e maturando-as óptimamente
  até reinjeção

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Tumores

• Ratinho A - estirpe C57BL6 Ko NK
• Ratinho B - estirpe BalB C Ko B2-microglobulina
• Ratinho C - estirpe Nude
• Qual o ratinho que melhor se defende de um tumor
• no baço que para escapar ao SI
• escondeu o seu MHC I?

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TRANSPLANTES
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Transplantes

• Transplante- termo usado em imunologia referente
  ao acto de transferir células, tecidos ou orgãos
  de um individuo saudável (dador) para o
  necessitado ( recipiente).
• Especificidade e memória da rejeição do
  transplante- a rejeição do graft pode demorar
  maior ou menor tempo dependendo do tecido, sendo
  que a reacção desenvolvida começa por um
  infiltrado linfocitário, de monócitos e
  neutrófilos no tecido vascularizado, para além de
  outras células inflamatórias as imunoglobulinas
  depositam-se nos pequenos vasos e formam trombos
  a vascularização do transplante vai diminuindo
  até se atingir necrose e rejeição completa-
  rejeição primária ( 7-8 dias)
• A memória imunológica é demonstrada na tentativa
  de um segundo transplante a rejeição é mais
  rápida e seguindo o mesmo padrão- rejeição
  secundária ( 2-3 dias)
• Locais de transplante imunologicamente
  priviligiados- olhos, cerebro,testículos e útero
  - ausência de tecido linfático

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Transplantes

• Os tipos de transplantes são
• autotransplantes- tecido self transferido de
  uma zona corporal para outra
• isotransplantes- tecido transferido entre
  indivíduos geneticamente idênticos
• alotransplantes- tecido transferido entre
  indivíduos geneticamente diferentes mas da mesma
  espécie
• xenotransplantes- tecido transferido entre
  diferentes espécies
• Podemos aínda considerar a doação in vivo e a
  doação de cadáver, quando há morte neurológica do
  dador
• Dependendo do tempo a rejeição do transplante
  pode ser
• a) hiperaguda, b) aguda ou c) crónica.
• A compatibilidade dador-recipiente depende de
• Sistema ABO
• Sistema HLA
• Anticorpos citotóxicos

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TransplantesMecanismos envolvidos na rejeição

• A rejeição do graft é mediada na sua maioria
  por uma resposta celular a aloantigénios (
  primariamente moléculas MHC) expressos nas
  células do graft são também implicadas
  reacções DTH e de citotoxicidade. O processo
  divide-se em 2 fases
• Fase de sensitização
• reconhecimento T CD4 e T CD8 dos aloantigénios
  e proliferação APCs do hospedeiro migram para o
  graft e endocitam os aloantigénios
  apresentando-os depois processados em peptidos
  migração de uma população leucocitária (incluindo
  APCs para os nódulos linfáticos - estimulação
  imune. Células dendríticas e células endoteliais
  vasculares induzem proliferação T, essencialmente
  T CD4
• Fase efectora
• mecanismos de DTH e CTL são maioritarios menos
  comuns são a lise por acção de complemento ou por
  acção de anticorpos (ADCC) característico
  infiltrado T e macrófagos e citoquinas secretadas
  pelas T CD4, das quais se destacam IL-2 (
  proliferação T e CTLs), IFN-? (DTH e influxo de
  macrófagos) e TNF ( efeito citotóxico directo)

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TransplantesImunossupressão pós-operatória

• Para evitar a rejeição recorre-se à terapia de
  imunossupressão com o objectivo de diminuir a
  proliferação ou activação linfocitária. Como são
  afectadas todas as células do SI as complicações
  podem ocorrer a longo - termo, com risco de
  cancro, hipertensão e de metabolismo ósseo.
• Terapia imunossupressora geral
• ciclosporina
• aziotropina
• Corticóides
• limfoplasmaferese
• irradiação linfocitária
• Imunossupr. específica
• mAb contra células T
• mAb contra citoquinas
• bloqueadores de co-
• estimulação

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Transplantes

• Actualmente em uso diário existem transplantes
• de rim
• do fígado
• do pâncreas
• de coração
• Pulmões/coração
• de medula..
• Cordão umbilical /embriões (em investigação)
• Para além da rejeição do recipiente ao
  transplante podemos aínda ter o caso em que o
  graft rejeita o recipiente- GVHD Graft versus
  host disease, regra geral com base em pequenas
  diferenças na histocompatibilidade ( também pode
  ser aguda ou crónica)