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Papel de la ATPasa de H y caracterizaci n de la actividad en ... Elicitors. Toxins. Receptors. Kinases. Enzymes. PLANT PLASMA MEMBRANE. 2ND MESSENGERS. NUCLEUS ... – PowerPoint PPT presentation

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1
MARINA GAVILANES RUÍZ. DEPTO. DE BIOQUÍMICA
TEMA DE INVESTIGACIÓN MEMBRANAS CELULARES DE
PLANTAS RELACIÓN ESTRUCTURA- FUNCIÓN
2
  • RESUMEN
  • LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN
  • LA MEMBRANA PLASMÁTICA EN LA GERMINACIÓN DEL MAÍZ
  • Papel de la ATPasa de H y caracterización de la
    actividad en tiempos tempranos
  • de la germinación
  • 2. LA MEMBRANA PLASMÁTICA EN EL ESTRÉS POR
    PATÓGENOS
  • Cambios en la actividad de la ATPasa de H , la
    glucan sintetasa II, la NADPH
  • oxidasa, la formación de microdominios, la
    permeabilidad y fluidez membranales,
  • la composición y metabolismo de lípidos y la
    relación con la activación de MAP cinasas

3
RESUMEN
La membrana plasmática es una estructura
dinámica que participa activamente en la
fisiología celular de la célula vegetal. En mi
laboratorio estudiamos como los componentes
moleculares de la membrana lípidos y proteínas,
entran en juego en procesos como la germinación
de semillas y la respuesta ante el ataque de
patógenos. Para ello, estudiamos a estas
moléculas tanto en su estructura como en su
función, centrándonos en la composición lipídica,
en la actividad de enzimas como la ATPasa de H y
la NADPH oxidasa, así como en propiedades
membranales como la fluidez y la permeabilidad.
Para ello utilizamos técnicas bioquímicas para
aislar a las membranas en forma de vesículas,
procediendo a su análisis por técnicas analíticas
para determinación de lípidos, proteínas y
actividades enzimáticas.
4
LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN 1. LA MEMBRANA
PLASMÁTICA EN EL DESARROLLO. Modelo Germinación
del maíz
H H H H
H
H
D


pH


_
_
DY





ATP
ADPPi
_

_
H
H
_
H
_
5
2. LA MEMBRANA PLASMÁTICA EN EL ESTRÉS. Modelo
Respuesta ante microorganismos patógenos
LA MEMBRANA PLASMÁTICA PUERTO DE PARTIDA Y DE
SALIDA DE RESPUESTAS A PATÓGENOS
6
ESTRATEGIA EXPERIMENTAL Y TÉCNICAS EMPLEADAS
Planta expuesta a la condición exptl . (embriones
de maíz en germinación, toxina fúngica)
Homogenización del tejido
Purificación de la membrana plasmática
Análisis de lípidos membranales Determinación de
la actividad de proteínas membranales
Asignación del papel funcional del lípido o de la
proteína estudiada en el contexto de la
germinación o de la respuesta a patógenos
7
TÉCNICAS Y EQUIPOS EMPLEADOS
8
COLABORADORES
FACULTAD DE QUÍMICA IRMA BERNAL LUGO ROSARIO
MUÑOZ CLARES JAVIER PLASENCIA DE LA PARRA ROGELIO
RODRÍGUEZ SOTRES ?? INSTITUTO DE FISIOLOGÍA
CELULAR JORGE RAMÍREZ SALCEDO DIEGO GONZÁLEZ
HALPHEN ROLANDO HERNÁNDEZ JORGE
SEPÚLVEDA ?? INSTITUTO NACIONAL DE
CARDIOLOGÍA MOHAMED EL HAFIDI ?? CINVESTAV
IRAPUATO LUIS GONZÁLEZ DE LA VARA ?? UAM-I DAVID
DÍAZ PONTONES
9
EJEMPLOS DE TRABAJOS PUBLICADOS
Sánchez-Nieto, S., Tuena de Gómez-Puyou, M.,
Rodríguez-Sotres, R. Carballo. A. y
Gavilanes-Ruíz, M. 1998. Comparison of the plasma
membrane H-ATPase activity in vesicles obtained
from dry and hydrated embryos. Biochimica et
Biophysica Acta. 1414 175-187.   Bernal-Lugo,
I. Rodríguez-Penagos, M, Gavilanes-Ruíz, M. and
Hamabata, A. 1999. Reduced aleurone ?-amylase
production in aged wheat seeds is accompanied by
lower levels of high ?-amylase transcripts and
reduced response to gibberelic acid. Journal of
Experimental Botany. 50, 311-317.   Yang, C.H.,
Gavilanes-Ruiz, M., Okinaka, Y., Vedel, R.,
Berthuy, I., Boccara, M., Chen, J. W., Perna, N.
T., and Keen. N. T. (2002). hrp Genes of Erwinia
chrysanthemi 3937 are important virulence
factors. Molecular Plant-Microbe Interactions.
15, 472-480.   Gutiérrez-Nájera, N.,
Muñoz-Clares, R., Palacios-Bahena, S., Ramírez,
J., Sánchez-Nieto, S., Plasencia, J. and
Gavilanes-Ruíz, M. (2005) Fumonisin B1, a
sphingoid toxin, is a potent inhibitor of the
plasma membrane H-ATPase. Planta. 221,
589-596.   Enríquez-Arredondo, C., Sánchez-Nieto,
S., Rendón.Huerta, E., González-Halphen, D.,
Gavilanes-Ruíz, M. and Gavilanes-Ruíz, M. (2005)
The plasma membrane H-ATPase of maize embryos
localizes in regions that are critical during the
onset of germination. Plant Science. 169, 11-19.
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