PREPARATIONS HISTOLOGIQUES

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PREPARATIONS HISTOLOGIQUES

• POUR MICROSCOPIE
• PHOTONIQUE

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2 grands types de préparation
-extemporanées non fixées, fraîches. -avantages
-inconvénients
-fixées et colorées -avantages -inconvénients
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1-Prélèvement dun organe
2-Fixation
But Figer les tissus dans létat le plus proche
de leur état initial
Moyens -Citez des fixateurs
-Le liquide de BOUIN
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3-Déshydratation
Élimination de leau permettant ensuite
linclusion dans la paraffine
70
100
95
Toluène
Alcool
Bains successifs dans des borels
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4-Inclusion
Le prélèvement est imprégné de paraffine fondue
afin de le rigidifier pour pouvoir le couper
ensuite
Séjour dans létuve 24h à 56C
Paraffine fondue
La paraffine est liquide à 56 . En dessous de
cette température, elle se solidifie.Limprégnati
on par la paraffine dépend de léchantillon
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On coule la paraffine fondue contenant le
prélèvement dans un moule constitué de 2
barres. A température ambiante, la paraffine se
solidifie
moule
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Coupe au microtome
Manivelle
Support du bloc de paraffine
Couteau en acier
ruban
pinceau
scalpel
Pointe sèche
lame
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Bloc de paraffine contenant le prélèvement
À chaque avancée du couteau, une coupe est
réalisée. Lensemble des coupes forment un
ruban récupéré sur un pinceau.
Réalisation de coupes fines ( 5 à 15 mm) car les
préparations sont traversées par les photons.
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A laide du scalpel on coupe le ruban quon
récupère à laide du pinceau. Des portions du
ruban sont disposées sur un support en verre la
lame
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6-Étalement et collage des coupes sur la lame
Les lames gravées et garnies de ruban de
paraffine sont disposées sur une platine
chauffante
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7-Déparaffinage
Étape assurant la réhydratation de la coupe afin
de la colorer
toluène , alcool 100, 95, 70, eau
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8-Coloration
Cuve à coloration
Support de lames
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9-Déshydratation
Eau, alcool à 7095100, Toluène
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10-montage
Entre lame et lamelle dans le baume du canada