L'ATP-m

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L'ATP-métrie

• Dossier réalisé par Justine Oliger et Julien
  Saez.
• BTS bio analyses et contrôles
• Ambérieu en Bugey

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Introduction

L'ATP-métrie permet une approche plus pratique de
cette molécule essentielle dont les élèves
entendent parler tout au long de leur cursus sans
jamais constater concrètement son existence. Nous
vous proposons donc une approche de ses
différentes techniques de dosages ainsi que leurs
principes.
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Qu'est-ce que l'ATP-métrie?

• Technique permettant d'effectuer une mesure
  simple et rapide du taux d'ATP (Adénosine
  TriPhosphate) cellulaire sur une surface qui sert
  a quantifier le nombres de microorganismes.
• Utilisée également en industrie agro alimentaire
  pour évaluer la contamination microbienne dans un
  aliment.

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La bioluminescenceApplication de l'ATP métrie

• L'ATP metrie est un technique de dosage
  instantanée de lATP (Adénine Triphosphate),
  molécule de stockage d'énergie présente dans les
  organismes vivants. La technique basée sur le
  principe de bioluminescence, est une réaction
  enzymatique traduisant une quantité d'ATP en
  quantité de lumière. Appliqué aussi au nettoyage
  désinfection elle permet la détection de résidus
  alimentaire et de développement microbien.

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La Bioluminescence PRINCIPE

• Cette technique utilise une enzyme, la
  luciférase.
• Elle a pour substrat la luciférine qui, avec de
  l'ATP, produit de la lumière quantifiable grâce à
  un bioluminomêtre. Une relation permet de
  connaître la concentration en ATP en fonction de
  la lumière.

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Mesure de l'ATP
Une relation permet d'établir un lien entre la
luminescence émise et la concentration en ATP.
Nous pouvons constater que la limite de détection
de cette technique est très faible, de l'ordre de
10-14 moles d'ATP.
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Présentation de l'enzyme la LUCIFÉRASE
Cette enzyme est une transférase d'un groupement
pyro-phosphate.
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DEMARCHE QUALITE

• Identifier rapidement les zones sensibles en
  matière de nettoyage et désinfection.
• Déterminer un seuil de tolérance en fonction des
  exigences du site ou de l'entreprise.
• Interpréter immédiatement les résultats et
  permettre la validation du nettoyage et de la
  désinfection de l'atelier en une heure.
• Permettre des actions correctives immédiates en
  cas de problème.
• Sensibiliser et responsabiliser le personnel à
  l'hygiène par une formation complémentaire.

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CONFORMITE AU PRINCIPE HACCP

• La directive européenne recommande, aujourd'hui,
  le recours au principe du HACCP pour la maîtrise
  de la qualité microbiologique des aliments.
• L'ATP métrie entre dans le cadre de cette
  démarche, car elle est un outil d'autocontrôle
  rapide du nettoyage désinfection, permettant de
  réaliser une surveillance et de décider d'actions
  correctives immédiates.
• On peut ainsi garantir au produit une sécurité
  optimale.

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ConclusionUtilisation de l'ATP métrie

• Vérification de nettoyage désinfection des
  surfaces en laboratoire.
• Vérification de la flore microbiologique dans les
  aliments.
• Oenologie Conformité du vin.(flore microbienne)
  

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Conclusionméthodes utilisées en laboratoire

• Bioluminescence .
• Dosage des nucléotides (colorimétrie) contenant
  l'ATP.

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Bibliographie

• http//www.silliker.fr/home/microbiologie.htmanal
  yse

http//www.liste-hygiene.org/arckits.html
http//www.didier-pol.net/3ATPBL.html
http//www.pasteur-lille.fr/fr/expertise/alimentai
re/pdf/atpmétrie.pdf