Sin ttulo de diapositiva - PowerPoint PPT Presentation

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Sin ttulo de diapositiva

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Sin ttulo de diapositiva – PowerPoint PPT presentation

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Title: Sin ttulo de diapositiva


1
Epigenética y desarrollo Fernando García
Osorio Enero 2006
2
(No Transcript)
3
La estructura cromatínica
4
Modificaciones epigenéticas
  • Unión a proteínas cromosómicas
  • Modificaciones posttraduccionales de histonas
  • Metilación de DNA
  • RNA de interferencia

5
(No Transcript)
6
(No Transcript)
7
(No Transcript)
8
Represión transcripcional
9
Metiltransferasas
  • de novo Metiltransferasas
  • Metiltransferasas de mantenimiento
  • Demetilasas

10
(No Transcript)
11
Metiltransferasas en Arabidopsis thaliana
  • MET (mantenimiento)
  • CMT (mantenimiento islas CpNpG)
  • DRM (de novo)

12
Técnicas de cuantificación
  • Técnicas de separación de alta resolución
  • Técnicas químico-enzimáticas
  • MSP

13
  • Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)
  • Electroforesis Capilar de Alta Resolución
    (HPCE)

14
- Rapidez - Económico - Válido para todos los
sistema biológicos
15
  • CONDICIONES ÓPTIMAS
  • Electrolito 48 mM NaHCO3 pH 9,6 60 mM SDS
  • Temperatura 20ºC
  • Voltaje 17 kV

-No se requieren muestras de elevada pureza o de
alta concentración. -Cuantificación rápida y
económica, análisis secuenciales. -Alta
repetitividad y fiabilidad -Permite la
separación de dA, dT y dG, estudios de
estabilidad o configuración cromosómica.
16
Cuantificación de 5-mdC mediante HPCE
17
MSP
  • Es un tipo de PCR especial
  • Sirve para conocer el estado de metilación de los
    promotores de genes cuya secuencia es conocida.
  • Se diseñan primer específicos para secuencias
    metiladas y sin metilar.

18
Importancia de la metilación en plantas
19
(No Transcript)
20
(No Transcript)
21
(No Transcript)
22
EXPRESIÓN GÉNICA DIFERENCIAL
MECANISMOS EPIGENÉTICOS
23
Metilación, envejecimiento, maduración y
revigorización
24
INDIVIDUOS ADULTOS SELECCIONADOS
MATERIAL JUVENIL
CAMBIO DE FASE
F.juvenil
F. Madura-vegetativa F.
Madura-reproductora Envejecimiento Senescencia
F. Embrionaria
REVIGORIZACIÓN
25
LOSS OF MORPHOGENIC ABILITY
26
(No Transcript)
27
(No Transcript)
28
(No Transcript)
29
(No Transcript)
30
Objetivos prácticos
  • Producción plantas de calidad con independencia
    de su edad
  • Mejora de protocolos tradicionales y de
    protocolos transgénicos

31
Metilación, poliaminas y etileno
32
(No Transcript)
33
  • Regulación de la expresión génica. Poliaminas y
    metilación del ADN

Put
Arg
Orn
Spd
dSAM
Spm
Silenciamiento génico
34
Metilación y desarrollo ontogénico
  • Met?

35
Patrones anormales de metilación provocan
desarrollos anormales en la planta
36
Quiescencia de la semilla
  • Deshidratación
  • Estructura especial de la cromatina
  • Inactividad transcripcional
  • DNA hipermetilado
  • La germinación implica un proceso activo de
    demetilación, conlleva al retorno de la actividad
    metabólica.

37
Estructura meristemo apical
38
Estructura meristemo apical
  • Población central
  • Bajas tasas de división
  • Alto contenido de metilcitosina
  • Población periférica
  • Altas tasas de división
  • Bajo contenido en metilcitosina
  • Floración implica reactivación tasas altas de
    división en la zona central, consecuencia de
    proceso de demetilación.

39
Metilación y floración
40
Factores que influyen en la floración
  • Fitohormonas
  • Duración del Fotoperíodo
  • Calidad de la luz incidente
  • Vernalización

41
Vernalización
  • Exposición a bajas temperaturas prolongadas
    promueve inicio floración en plantas susceptibles
  • Se conocen varios genes implicados en el proceso.

42
Flowering Locus C (FLC)
  • Gen papel central en el control de el inicio de
    la floración mediado por vernalización.
  • Correlación entre bajas temperaturas y
    disminución en la expresión del gen.
  • Gen codificante de una proteína familia MADS-box
    potente inhibidor de genes claves en proceso de
    floración.
  • Regulación expresión FLC proceso complejo.

43
FLC MADS-box
44
Efecto demetilación en el inicio de la floración
  • Inducción proceso de demetilación acelera el
    proceso de floración.
  • Correlación entre bajas temperaturas y proceso de
    demetilación.

45
Existe una triple correlación entre
vernalización, disminución de expresión en FLC y
demetilación?Está controlada la expresión de
FLC por un proceso de metilación del DNA?
46
Control en la expresión de FLC Metilación de
histonas
47
Control FLC
  • La expresión de FLC está controlada por la
    metilación de la histona H3 en el propio gen.
  • La metilación silenciará el gen a largo plazo.
  • Parece haber algún tipo de correlación entre la
    expresión de FLC y la metilación del DNA.

48
Metilación y giberelinas
  • Metilación implicada en control enzima de la ruta
    biosíntetica de giberelinas.
  • Giberelinas con conocida acción promotora de la
    floración en ruta señalización independiente a
    vernalización.

49
FIN
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