UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANALISIS ESCUELA DE BIOAN

1
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE
FARMACIA Y BIOANALISISESCUELA DE BIOANÁLISIS
Colinesterasa Plasmática en el Ganado Vacuno de
la Zona Sur del Lago de Maracaibo

MSc. José Rafael Luna
Junio de 2005
2
(No Transcript)
3
Con los fines de producir, incrementar y
preservar la producción Láctea y Cárnica

• Se ha luchado contra las distintas plagas que
  amenazan la ganadería y los productos agrícolas
  que la sostienen
• Y se combaten los insectos y otros animales,
  vectores de enfermedades transmisibles.

4
Ectoparásitos

• Garrapata
• Boophilus microplus
• Este ixódido transmite enfermedades hemotrópicas
  del bovino
• -Babesiosis (fiebre tic)
• -Anaplasmosis

5
 BOOPHILUS - Adult Male
6
BOOPHILUS - Adult Female
7
(No Transcript)
8
(No Transcript)
9
Babesiosis
10
AnaplasmosisAnaplasma marginale
11
Consecuencias

1. Retardo del crecimiento
2. Trastornos de desarrollo y conformación
3. Disminución de la producción de leche
4. Reducción de las ganancias de peso que conlleva a
   la disminución de la producción de carne
5. Desmejoramiento de la calidad de los animales, lo
   cual disminuye el valor comercial de los mismos
6. Abortos y esterilidad que frenan el aumento
   natural de los rebaños
7. Finalmente la muerte.

12
Perdidas económicas

• Brasil 1000 millones de anuales
• Australia 100-150 millones de anuales
• Cuba 100.000 cabezas en la última década
• Venezuela la población bovina actual se estima
  en un promedio 12 millones de cabezas con una
  prevalencia del 85 del B. microplus (Power y
  Silvestri, 1984)

13
controles sanitarios

• Erradicación de la B. microplus mediante el uso
  de acaricidas
• 1. Fosforados
• 2. Carbamatos
• 3. Diamidinas
• 4. Piretroides sintéticos

14
Organofosforados y Carbamatos

1. Actúan inhibiendo la transmisión neuromuscular
   del artrópodo afectando la enzima acetil
   colinesterasa.
2. Son medianamente tóxicos para el huésped y la
   persistencia varía acorde a la molécula
   utilizada.
3. Se utilizan tanto como mosquicidas y acaricidas.

15
Métodos de aplicación

• Aspersión
• Inmersión
• Derrame dorsal (pour-on)

16
Desarrollo de resistencia

• Cambios del comportamiento
• Disminución de la permeabilidad de la cutícula,
  resultando una menor penetración del acaricida a
  la hemocele
• Aumento de la biotransformación del tóxico
  (resistencia metabólica)
• Disminución de la sensibilidad en el sitio de
  acción del tóxico

17
Factor de resistencia (FR)
Región Plaguicida FR
Mérida Coumafos 6.80
Trujillo Coumafos 32.26
Lara Coumafos 39.52
Zulia Coumafos 36.36
Coronado A, 1997
18
Acciones negativas en los controles sanitarios

• Debido a que los productos agrícolas son más
  baratos que los acaricidas algunos ganaderos los
  utilizan para el control de la garrapata

19
(No Transcript)
20
(No Transcript)
21

• La toxicidad del producto
• Forma de aplicación de estos compuestos

22

• Diluciones incorrectas
• Bajo volumen de solución acaricida por animal
• Bombas con presión muy alta o deficiente
• Boquillas inapropiadas

23
Resistencia

• Intoxicación del Animal

24
MECANISMO DE ACCIÓN FISIOPATOLÓGICO
ESTRUCTURA DE UNA NEURONA Y SINAPSIS NEURONAL
25
(No Transcript)
26
(No Transcript)
27
(No Transcript)
28
(No Transcript)
29
(No Transcript)
30
(No Transcript)
31
(No Transcript)
32
Síntomas Muscarínicos

• Salivación abundante
• Diarrea
• Lagrimeo
• Disnea
• Tos frecuente
• Miosis

33
Síntomas Nicotínicos

1. Contracciones de los músculos de los parpados,
   lengua y musculatura en general
2. Tetania generalizada
3. Debilidad y parálisis de los músculos
   esqueléticos

34
Síntomas del SNC

• Inicialmente se presenta una estimulación
  seguido de una Depresión del SNC
• Ataxia

35
(No Transcript)
36
(No Transcript)
37
METODO POTENCIOMETRICO DE MICHEL
En el método potenciométrico de Michel para
eritrocitos y plasma, la cantidad de ácido es
medida en términos de cambio de pH producido por
la actividad enzimática en una solución tampón
estándar en un período de tiempo definido.
?pH/hora
38
METODO DE ELLMAN

• En este método la actividad de la
  acetilcolinesterasa es medida por el color
  amarillo producido por la tiocolina cuando
  reacciona con ditiobisnitrobenzoico (DTNB) a una
  absorbancia de 412 nm.
• Actualmente fundamenta los equipos para
  determinar colinesterasa de muchas casas
  comerciales tales como la Boheringer, Wiener,
  etc.

39
Valores promedios de la enzima colinesterasa en
276 bovinos hembras del Estado Carabobo  
  Novillas Edad 16 a 20 meses Holstein Puro Edad 3 a 7 años Adultas Holstein Puro Adultas Edad 3 a 7 años Mestizo P. Suizo
CE (µM.mL-1) 1,26 0,22 1,14 0,28 1,14 0,28
40
Valores promedios de la enzima colinesterasa en
357 bovinos hembras del Estado Guárico 
  Cebú Puro Mestizo Holstein Mestizo Pardo Suizo Mestizo Cebú
Parámetros (Unidades) (n 40) (n 40) (n 98) (n 179)
CE (µM.mL-1) 1,25 0,15 1,24 0,15 1,32 0,14 1,23 0,19
Colinesterasa eritrocítica (CE) se determinó
según el método fotométrico de FLEISHER y POPE,
modificado por PETTY y LOWELL, mediante un
fotocolorímetro Klett-Summerson, expresando la
actividad en micromoles de acetilcolina
hidrolizada por mililitro de sangre total
41
PROBLEMA
CUALES VALORES DE REFERENCIA DE LA COLINESTERASA
SE UTILIZARÍAN EN CASO DE INTOXICACIÓN POR
INHIBIDORES DE LA MISMA
42
OBJETIVO GENERAL
    Determinar los valores de referencia de la
actividad de la colinesterasa plasmática en
muestras provenientes de ganado vacuno.
43
DISEÑO EXPERIMENTAL

• INSTRUMENTO DE RECOLECCIÓN DE DATOS
• Plaguicidas utilizados con fines pecuarios y
  agrícolas
• Características del animal
• Estado de salud
• otros

44
Características de la población estudiada

• Hembras de producción lechera
• De 4 a 6 años de edad, con peso de 380 a 450 Kg
• De raza mestiza Pardo-Hosltein y Pardo-Cebú

133 ANIMALES ZONA SUR DEL LAGO
45

• Las fincas además de dedicarse a la producción
  lechera presentan ganadería equina y poseen
  actividad agrícola
• 2,4-D amina 6 libras ( ácido 2,4-Difenoxiacético
  70)
• Combo ( Picloran 24 Metsulfuran 60)
• Gramoxone N.F (Paraquat 18.50)
• Garafos (Malathion 99)

46
PUNCIÓN VENA YUGULAR CON AGUJA N 18
SE APLICO EL MÉTODO DE ELLMAN MODIFICADO (CASA
COMERCIAL WIENER)
47
Pruebas de normalidad Kolmogorov-Sminov
P 0.200 n.s 0.05
Este resultado permite demostrar que no se tiene
evidencia suficiente para rechazar que los datos
obtenidos no se ajusten a una distribución normal.
48
Gráfico Q-Q Normal para todas las observaciones
poblacionales.
49
Gráfico Q-Q Normal sin tendencia para todas las
observaciones poblacionales.
50
PARA HALLAR EL INTERVALO DE REFERENCIA SE APLICO
EL MÉTODO DEL FACTOR K
(L x ks) lt p lt (U x ks)
El intervalo tendrá la siguiente forma 1-?
0,95 k 1,96
51
VALORES ENCONTRADOS
L 365,57 1,9653,01 251,77
U 365,57 1,9653,01 459,57
251,77 lt VR (U.L-1) lt 459,57
52
Valores de colinesterasa obtenidos de animales
ubicados en la zona.
Muestra de animales aparentemente sanos Colinesterasa (U/L) ( 251.77 459.57 U/L)
Animal 1 378.49
Animal 2 431.41
Animal 3 340.65
Animal 4 401.20
Muestra de Animal intoxicado (Garafos) 158.97
53
CONCLUSIONES
Que los valores de referencia de la colinesterasa
obtenidos por el método de Ellman modificado
(Wiener) estuvieron entre 251.77 y 459.57 U.L-1
54
Se puede decir finalmente que el intervalo de
referencia de la enzima colinesterasa obtenido de
la muestra poblacional evaluada puede ser útil
para el diagnóstico de intoxicación por
plaguicidas inhibidores de la colinesterasa
55
RECOMENDACIONES
56
(No Transcript)