STERILIZAREA SI DEZINFECTIA

1
STERILIZAREA SI DEZINFECTIA
2

• Sterilizarea distrugerea sau indepartarea
  tuturor microorganismelor, inclusiv a sporilor.
• Dezinfectia distrugerea formelor vegetative ale
  microorganismelor, dar nu in mod necesar si a
  sporilor.

3
STERILIZAREA

• Agenti fizici
• Caldura
• Frigul
• Uscarea
• Radiatiile
• Ultrasunetele
• Presiunea mecanica
• Presiunea osmotica

4
DEZINFECTIA / ANTISEPSIA

• Agenti chimici
• Substante chimice elementare
• Compusi anorganici
• Compusi organici

5
STERILIZAREA PRIN CALDURA

• Punctul termic mortal cea mai scazuta
  temperatura care distruge in 10 minute toate
  bacteriile unei specii in conditii standard (1
  2 ml. suspensie bacteriana in concentratie de
  50.000 UFC/ml., in tampon fosfat, pH 7

6
STERILIZAREA PRIN CALDURA

• Timpul termic mortal cel mai scurt interval de
  timp necesar pentru ca toate bacteriile unei
  populatii microbiene sa fie distruse la o
  temperatura data

7
STERILIZAREA PRIN CALDURA

• Caldura umeda
• Autoclavarea
• Fierberea
• Tindalizarea
• Pasteurizarea
• Caldura uscata
• Cuptoare speciale cu aer cald (pupinele sau
  etuve)
• Aducerea la incandescenta
• Flambarea
• Incinerarea

8
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAAUTOCLAVAREA

• Caldura umeda distruge bacteriile mai repede
  decat caldura uscata la aceeasi temperatura
  deoarece este mai penetranta.
• Sterilizarea prin caldura umeda utilizeaza
  vaporii de apa sub presiune in autoclav.
• 121 C 15 min.
• 134 C 3 min.

9
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAAUTOCLAVAREA

• Bacteriile in forma vegetativa sunt distruse la
  temperaturi cu 10 15 C mai mari decat
  temperatura lor maxima de dezvoltare.
• Majoritatea bacteriilor in forma vegetativa mor
  in timp de 10 minute la 50 60 C.

10
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAAUTOCLAVAREA

• Majoritatea sporilor bacterieni sunt distrusi in
  10 minute la 100 C.
• Sporii de Clostridium botulinum pot rezista 8 ore
  la 100C.
• Cel mai rezistent sporul de Bacillus
  stearotermophilus, acesta necesita pentru
  distrugere 15 18 minute la 121C si 40 minute
  la 115C.
• Sporii de B. stearotermophilus indicator in
  aprecierea eficientei sterilizarii prin caldura
  umeda.

11
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDA

• Ce se poate steriliza prin autoclavare?
• Instrumentar medical
• Material moale (pansamente, campuri operatorii,
  halate etc.)
• Solutii perfuzabile
• Materiale de laborator (medii de cultura,
  tampoane pentru recoltari prelevate, materiale
  infecte).

12
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAFIERBEREA

• Prin fierbere timp de 30 minute se distrug
  bacteriile in forma vegetativa, virusurile si
  fungii, dar rezista unii spori bacterieni.

13
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDATINDALIZAREA

• Sterilizare fractionata prin mentinerea
  substantelor la temperaturi de maximum 100 C
  timp de 30 60 minute succesiv timp de mai multe
  zile (3 8).
• In intervalele dintre incalziri recipientele se
  mentin la temperatura camerei, timp in care
  eventualii spori prezenti in preparat vor trece
  in forma vegetativa si astfel vor fi distrusi la
  incalzirea ulterioara.

14
STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAPASTEURIZAREA

• Prin incalziri la 62 - 85C pe perioade de timp
  variabile este o metoda de conservare a unor
  produse alimentare.
• Sunt distruse formele vegetative ale bacteriilor
  si fungii, dar rezista sporii si
  enterovirusurile.
• In functie de temperatura se disting 3 tipuri de
  pasteurizare
• - Inalta 8 15 sec. la 85C
• - Mijlocie 40 45 sec. la 71 74 C
• - Joasa 30 min. la 62 - 65C

15
STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATACUPTOARE CU AER
CALD (ETUVE)

• Formele vegetative ale bacteriilor sunt distruse
  prin caldura uscata in 10 minute la 60 80 C.
• Sporii cei mai rezistenti de B. stearotermophilus
  in 20 minute la 180 C.
• 1 ora 180 C

16
STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATACUPTOARE CU AER
CALD (ETUVE)

• Ce se poate steriliza prin caldura uscata?
• Sticlarie de laborator
• Obiecte de portelan
• Unele instrumente medicale
• Substante sub forma de pulbere
• Solutii neapoase

17
STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAADUCEREA LA
INCANDESCENTA

• Se sterilizeaza ansa bacteriologica si spatula
  pentru folosire unica.
• Nu se indica utilizarea acestei metode pentru
  instrumente medicale (foarfeci, pense, ace),
  deoarece se pot degrada.

18
STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAFLAMBAREA

• Trecerea prin flacara timp de cateva secunde a
  obiectului de sterilizat (gura eprubetelor,
  flacoanelor, partea efilata a pipetelor Pasteur
  etc.).

19
STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAINCINERAREA

• Se foloseste pentru materialele infectate care nu
  se recupereaza
• Siringi de unica folosinta
• Pansamente
• Animale de experiente
• Deseuri biologice rezultate din laboratoarele de
  microbiologie
• etc.

20
STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATA

• Mecanismul distrugerii bacteriilor prin caldura
  uscata consta in
• accelerarea fenomenului de oxido reducere
• asfixie
• coagulare
• carbonizare.

21
FRIGUL

• Bacteriile suporta, in general, mai bine
  temperaturile scazute decat pe cele ridicate.
• La temperaturi sub cea minima de crestere
  metabolismul si inmultirea bacteriilor inceteaza,
  majoritatea trecand in stare de latenta.

22
FRIGULREFRIGERAREA

• La 4 - 10 C majoritatea bacteriilor rezista
  luni si ani de zile cu conditia eviatarii
  uscarii.
• Unele bacterii care se intalnesc numai la om
  (meningococii, gonococii) nu sunt rezistente si
  mor repede la temperaturi sub cea optima.

23
FRIGULCONGELAREA

• In general, la 0C efectul temperaturii este
  bactericid.
• Moartea bacteriilor se produce prin inghetarea
  apei de solvire cu formarea de pungi cu solutii
  hiperconcentrate care au efect toxic si/sau
  producerea de cristale de gheata.

24
FRIGULCONGELAREA

• La temperaturi mult sub 0C, de -30C pana la -
  70C nu se constata un efect bactericid deoarece
  la aceste temperaturi nu se formeaza pungi cu
  slotii hiperconcentrate sau cristale de gheata.
• Efectul bactericid este mai puternic prin
  repetarea operatiunilor de inghetare si
  dezghetare.

25
USCAREA

• Actiunea uscarii difera in functie de forma de
  viata a bacteriilor.
• Formele vegetative sunt mai sensibile, fiind
  distruse prin concentrarea sarurilor si
  denaturarea fizico chimica a proteinelor.

26
USCAREA

• Pentru formele vegetative rezistenta la uscare
  depinde de continutul in lipide al invelisurilor
  celulare cu cat cantitatea de lipide este mai
  mare, cu atat pierderea de apa se produce mai
  incet.
• Ex - micobacteriile care au in compozitia lor
  40
• lipide rezista timp de 6 8 luni in
  praf,
• - bacilii Gram (-) cu 20 lipide rezista doar
  1 2 saptamani
• - pneumococul moare in cateva ore in conditii
  de uscaciune
• - gonococul se distruge imediat.

27
USCAREA

• Pentru conservarea bacteriilor in laborator se
  intrebuinteaza liofilizarea, metoda de uscare in
  stare de congelare sub vid.
• Prin liofilizare bacteriile pot supravietui timp
  indelungat chiar pastrate la temperatura camerei.

28
RADIATIILEU.V. LUMINA SOLARA

• Lumina solara, datorita continutului in U.V. are
  efect bactericid, efect influentat de
  permeabilitatea atmosferei.
• Lumina solara constituie factorul principal de
  reducere a florei microbiene a aerului, de pe
  suprafata solului si in apele limpezi, putin
  adanci.
• Timpul de distrugere este variabil in functie de
  specia bacteriana 1h pentru E.coli, 2 3 h
  pentru Salmonella typhi si 5 7 ore pentru
  Mycobacterium tuberculosis.

29
RADIATIILEU.V.

• U.V. (240 280 nm.) distrug bacteriile pe de o
  parte direct prin absorbtia lor de catre acizii
  nucleici si proteinele bacteriene, absorbtie
  urmata de rupturi ale legaturilor chimice cu
  formarea de noi legaturi intre pirimidine si pe
  de alta parte indirect prin modificari ale
  mediului producerea de ozon in aer si peroxizi
  in ape, compusi care nu au actiune antibacteriana.

30
RADIATIILEU.V.

• In practica U.V. se folosesc pentru
  decontaminarea suprafetelor si a aerului in
  incaperi de policlinica si spital, in Sali de
  operatie si laboratoare.
• Fotoreactivarea fenomenul prin care bacteriile
  au fost distruse prin U.V. sunt reactivate prin
  expunere la lumina puternica, cu lungimea de unda
  de 400 nm.
• In aceste conditii se activeaza o enzima care
  desface dimerii pirimidinici formati sub actiunea
  U.V.

31
RADIATIILERADIATIILE IONIZANTE

• Radiatiiile X si gamma au efect bactericid prin
  ionizare cu formare de radicali de oxigen
  bactericizi.
• Radiatiile ionizante se folosesc indeosebi pentru
  sterilizarea produselor termolabile (ex.
  instrumentar medical din material plastic de
  unica folosinta).

32
ULTRASUNETELE

• Efectul bactericid se exercita datorita
  fenomenului de cavitatie prin activarea gazelor
  dizolvate in citoplasma, urmata de ruperea
  peretelui celular.
• In medicina ultrasunetele se folosesc la
  sterilizarea unor instrumente medicale.

33
PRESIUNEA MECANICA

• Majoritatea bacteriilor in forma vegetativa
  rezista bine la 3.000 atm., pierderea
  viabilitatii producandu-se dupa 14 ore la 6.000
  atm.
• Sporii bacterieni sunt mult mai rezistenti,
  necesitand pentru inactivare 12.000 20.000 atm.

34
PRESIUNEA OSMOTICA

• La o presiune osmotica mai mare, in mediu
  hipertonic se produce uscarea osmotica a
  bacteriilor prin trecerea in stare de latenta sau
  moartea lor. Apa iese din celula, citoplasma se
  retracta impreuna cu membrana citoplasmatica care
  se desprinde de peretele bacterian.
• Hiperosmolaritatea se foloseste in conservarea
  alimentelor prin concentratii mari de sare sau de
  zahar.

35
PRESIUNEA OSMOTICA

• In medii hipotone celula bacteriana se hidrateaza
  , devine turgescenta, se rup invelisurile
  obtinandu-se moartea celulei.

36
DEZINFECTANTE

• Substante chimice elementare
• O2, H2,
• metale grele Ag., Hg., Cu.
• Compusi anorganici
• acizi acid boric, acid salicilic, H2SO4, HCl.
• baze NaOH
• saruri AgNO3, clorura de Hg., permanganat de
  potasiu, bicromat de potasiu, sulfat de cupru

37
DEZINFECTANTE

• Compusi organici
• Detergenti anionici si cationici
• Fenoli, alcooli, eteri
• Aldehide
• Coloranti

38
TEMA PENTRU STUDENTI

• Continuati prezentarea Power Point cu detalii
  despre dezinfectante si antiseptice
• Clasificarea lor
• Mecanisme de actiune
• Cateva notiuni despre fiecare dintre ele
• Trimiteti pe mail la adresa stanca_lucia_pandrea_at_
  yahoo.com