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Formation des v

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Crit res d'alerte signes cliniques et diagnostic diff rentiel ... 1959 : poulet H5N1, cosse. 1963 : dinde H7N3, Angleterre, 29 000. 1966 : dinde H5N9, ... – PowerPoint PPT presentation

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Title: Formation des v


1
Formation des vétérinaires sanitaires à la lutte
contre linfluenza aviaire hautement pathogène
Version du 31 janvier 2006
2
Plan
  • Épidémiologie Rôle de lavifaune
  • Critères dalerte signes cliniques et
    diagnostic différentiel
  • Moyens de diagnostic expérimental
  • Biosécurité

3
Historique
  • 1959 poulet H5N1, Écosse
  • 1963 dinde H7N3, Angleterre, 29 000
  • 1966 dinde H5N9, Ontario, 8 100
  • 1976 poulet canards H7N7, Victoria 42 000 et
    16 000
  • 1979 poulet, dinde H7N7, Angleterre,
  • 1983 poulet, dinde H5N2, Pennsylvanie, 17
    millions (6millions US )
  • 1985 poulet H7N7, Victoria, gt200 000
  • 1991 dinde H5N1, Angleterre, 8000 dindes
  • 1992 poulet canards H7N312 700 5 700
  • 1994-2003 poulet H5N2, Mexique un milliard
  • 1995-2003 poulet H7N3, Queensland 22 000
    Pakistan 3,2 millions
  • 1997 poulet H7N4, NGS, 170 000
  • 1997 poulet H5N1 Hong Kong 1,4 millions 18 cas
    humains (6 ?)
  • 1997 poulet et nbx autres espèces H5N2, Italie
  • 1999 dinde, H7N1 Italie, 4 millions 6
    millions de poulets
  • 2002 poulet H7N3
  • 2003 poulet H7N7 Hollande, 30 millions (/100),
    80 cas humains (1 ?)
  • 2003-2005 poulet H5N1, Sud Est Asiatique, gt120
    millions, 114 cas humains
  • 2004 poulet H7N3 Colombie britannique, gt 19
    millions

4
  • SIX RAISONS DE SINQUIETER
  • Augmentation des foyers ( tous sous-types )
  • Mortalité avifaune sauvage ( H5N1 asiatique )
  • Contamination despèces mammalienne
  • Tigres
  • Risque économique
  • (baisse de 20 de la consommation
  • risque de blocage des exportations )
  • Risque zoonotique
  • Zoonose établie mais à incidence faible
  • Stade 3 de lalerte de lOMS
  • Hypothèse pandémie

5
Cycle épidémiologique
IAFP
IAHP
Réservoir
Cible
Souches faiblement pathogènes  FP 
Risque de sélection souches pathogènes
6
Sources et transmission
  • Voies dexcrétion
  • Respiratoire
  • Digestive
  • Sources Voies de contamination
  • Fientes (matières contaminées)
  • Eaux
  • Sang et tissus
  • dans le cas dinfection HP
  • Transmission
  • Principalement fécale
  • Contagion directe/ indirecte

7
Transmission intercontinentale Couloirs de
migration
8
Transmission intercontinentale Rôle du
 transsibérien  ?
9
Exemples doiseaux provenant de la zone infectée
(S.O. Sibérie)
pilet
souchet
fuligule milouin
sarcelle hiver
sarcelle dété
10
La  cocotte  africainefermenteur ou
stérilisateur ?
Nature, 437 (2005)
FAO/ EMPRES (Avibulletin 36, 15 nov. 2005)
11
4 Voies migratoires traversent la France
12
Espèces  à risque 
colvert
siffleur
s. été
f.milouin
c.morillon
vanneau
c. varié
m. rieuse
g. cendré
13
Risque épizootie, anadémie, épidémie
14
Critères dalerteSignes cliniquesDiagnostic
différentielINFLUENZA AVIAIRE HAUTEMENT
PATHOGENEI.A.H.P
15
MOTIFS DE CONSULTATION
  • Mortalités brutales et en progression
  • Baisse brutale et importante des consommations
  • Signes respiratoires marqués
  • Signes nerveux
  • Arrêt ( ou baisse ) de ponte

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QUESTIONNAIRE CONSULTATION
  • Espèces présentes et nombre
  • Age des malades
  • Symptômes 
  • depuis quand  ____________
  • mortalité par jour _____ pendant combien
    de jours ______
  • chute de ponte par jour _____ pendant
    combien de jours ______
  • baisse de consommation
  • aspect extérieur  tête sinus crête barbillon
    s pattes
  • respiratoire  toux jetage dyspnée
  • digestif  diarrhée sang couleur 
  • nerveux  prostration convulsions torticolis
  • silence

17
Critères zootechniques mortalité
18
  mortalité en 1 jour mortalité par jour pendant 2 jours consécutifs mortalité par jour pendant 2 jours consécutifs
      J J 1
DINDES Chair plein air 4 0,5 0,5
POULETS DE CHAIR Chair plein air 4 0,5 0,5
POULE PONDEUSES En ponte 4 0,5 0,5
PINTADES Chair plein air 4 0,25 0,25
CANARDS Chair 2 0,5 0,5
  PAG 2 0,25 0,25
OIES Chair 2 0,5 0,5
FAISANS   4 0,25 0,25
PERDRIX   4 0,25 0,25
COLVERTS   4 0,25 0,25
PIGEONS Jeunes 4 1 1
PIGEONS adultes 4 0,25 0,25
19
Critères dalerte mortalité
  • Quelques exemples

Effectif lot 4 mortalité sur 1 jour 1 par jour sur 2 jours
Dinde chair 500 20 5
Poulet standard 1 000 40 10
Pondeuse œuf consommation 1 000 40 10
20
Critères dalerte mortalité
  • Une mortalité lot de 1000 poulets
  • importante et
  • en progression

21
Critères dalerte mortalité
  • Quelques exemples canard
  • Niveau de mortalité ? Particularités de lespèce
    canard

Effectif lot 2 mortalité sur 1 jour 0.5 par jour sur 2 jours
Canard chair 1 000 20 5
Prêt A Gaver 700 15 3-4
22
AUTOPSIES
  • Suspicion ne pas apporter ni envoyer au
    laboratoire
  • Précautions protection des personnes et
    pratique de lautopsie en évitant la diffusion
    des matières virulentes
  • Autopsie des morts et des moribonds en préservant
    des animaux pour les analyses officielles en cas
    de déclenchement de suspicion

23
En cas de signes cliniques inhabituels
  • Démarche diagnostic élimination des hypothèses
    les plus probables pour lespèce , lâge
    considéré et la région ( diagnostic
    différentiel )

24
CYANOSE DE LA CRETE ET DES BARBILLONS
I.A.H.P ? PASTEURELLOSE ?
25
LESIONS HEMORRAGIQUES
I.A.H.P
26
TRACHEITE HEMORRAGIQUE
I.A.H.P
Laryngo.Trachéite.Infectieuse
27
Lésions hémorragiques
I.A.H.P ? PASTEURELLOSE ? ROUGET ?
NORMAL
28
LESIONS SEPTICEMIQUES
I.A.H.P
PANCREATITE
TYPHOSE
29
LESIONS HEMORRAGIQUES
NEWCASTLE
GUMBORO
30
SIGNES NERVEUX
ENCEPHALOMALACIE
Botulisme
NEWCASTLE
31
Mais FAISANS , CAILLES , PINTADES , AUTRUCHES
32
PARAMYXOVIROSE DU PIGEON
VACCINATION OBLIGATOIRE
33
Influenza aviaire les moyens de diagnostic
expérimental
34
Le paysage des grippes animales
AH3N8
AH1 à H16
AH1N1 H3N2
AH5,H7
Virus B,C et AH1N1, H3N2
35
Quelles sont les caractéristiques des virus
grippaux?
H16N9
36
Quelles sont les caractéristiques des virus
grippaux?
  • Des virus très évolutifs
  • Virus à ARN ? Mutations
  • ARN segmenté ?  mélanges  de 8 brins dARN
  • Des virus peu résistants dans le milieu extérieur
  • La contamination est essentiellement associée à
    lanimal infecté, vivant ou mort.
  • MAIS peut survivre plusieurs semaines en milieu
    liquide
  • Inactivé en quelques secondes à 70C
  • 2 à 6 jours à 37C
  • gt7 jours à 20C
  • gt1 mois à 4C
  • gt100 jours lisier en hiver

37
Quelles sont les conséquences pour le diagnostic?
  • Des virus très évolutifs
  • Variation antigénique et génétique variable selon
    les protéines
  • Forte pour HA et NA (exposées au Systéme Immuno)
  • Faible pour NP et M1/M2
  • Cibles  universelles  pour le diagnostic (IDG
    et RT-PCR)
  • Des virus peu résistants
  • Nécessité de travailler sur des cadavres frais
    et animaux moribonds
  • Acheminement rapide sous froid positif (DDSV)

38
Les relations hôte-virus dépendent du virus
  • Infection localisée aux muqueuses respiratoires
    et digestives
  • IAFP (H1 à H16)
  • Infection systémique diffusion du virus dans
    tous les tissus
  • IAHP (H5 et H7)
  •  Peste aviaire 

39
Virus H5/H7 Faiblement ou Hautement pathogène?

Hémagglutinine
Site de clivage
  • ------PEIPKGRGLF--- FP
  • -----PENPKGRGLF--- FP
  • ---PEIPKKKKRGLF--- HP
  • -PETPKRKRKRGLF--- HP
  • -PEIPKKREKRGLF--- HP
  • --PETPKRRRRGLF--- HP

40
En bilan
  • Les virus IA ont un comportement variable
  • Tropisme digestif et/ou respiratoire
  • Virulence variable selon les hôtes
  • Virulence variable selon les génotypes
  • Deux schémas pathogéniques
  • IAHP distribution généralisée du virus
    viscères prélèvements de choix
  • IAFP distribution essentiellement mucosale
    écouvillons trachéaux /cloacaux
  • Un virus H5/H7 FP est un HP en puissance
  • Mutation ponctuelle au site de clivage suffit

41
Le diagnostic virologique principes
  • Objectifs
  • isoler le virus ou détecter sa signature
    (protéine, séquence génétique)
  • Si Influenza Aviaire? caractériser lisolat
    (pathogénicité)
  • Techniques disponibles
  • Isolement viral
  • RT-PCR

42
Le diagnostic virologique isolement viral
  • Inoculum broyat dorganes
  • ou écouvillons
  • Inoculation dœufs embryonnés
  • Voie allantoïdienne
  • Délai de réponse 2 à 12 jours
  • Si mortalité embryonnaire IHA (inhibition de
    lhémagglutination)
  • Si H5/H7 séquençage site de clivage IPIV
  • Si non H5/H7 et suspicion IAHP IPIV
  • encéphaletrachéepoumonratefoierein
    intestins

43
La caractérisation du pouvoir pathogène
  • Méthode de référence indice de pathogénicité
    par inoculation IV (IPIV)
  • Inoculation de 10 poulets de 6 semaines
  • Suivi clinique sur 10j
  • Score 0 si RAS / 1 si 1 signe majeur / 2 si 2
    signes majeurs / 3 si mort
  • Index total des scores/ nb jours. Si gt 1,2
    IAHP
  • Réponse sous 10 jours
  • Analyse moléculaire du site de clivage
    hémagglutinine
  • Très bien corrélé au pouvoir pathogène
  • Réponse sous 48h

44
Le diagnostic sérologique Techniques
  • Pour des enquêtes et complément
  • de diagnostic (séroconversion en 8 jours)
  • Immunodiffusion en gélose (IDG)
  • Détection des Ac précipitants
  • Utilisée chez poulet et dinde
  • Délai 48h
  • Inhibition de lhémagglutination (IHA)
  • Détection de lHémagglutinine
  • Utilisée chez palmipèdes, pintades
  • et cailles
  • Délai 24h

45
En pratique principes à retenir pour les
prélèvements
  • Pour la virologie
  • Prélèvements de tissus les plus frais possibles
    (idéal animal mourrant sacrifié)
  • Attention au choix des animaux morts rejeter
    tout animal dont les tissus sont autolysés
  • Prélever les tissus les plus proprement possible
    pour faciliter la mise en culture
    (contaminations)
  • Acheminer en urgence au laboratoire agrée
  • Pour la sérologie (cf CD-rom)
  • Coucher le tube dès après le prélèvement pour
    faciliter la formation du caillot
  • Laisser à température ambiante 2 à 3 heures, puis
    au frigo (4C)

46
En pratique conduite à tenir face à une
mortalité groupée doiseaux sauvages
  • Instruction des pouvoirs publics (DDSV) Note de
    service DGAL/SDSPA/N2005-8235 du 19 octobre 2005
  • Dans le cadre dune mortalité groupée doiseaux
    sauvages, les cadavres doivent être transmis
    ENTIERS au LVD, seul habilité à effectuer les
    opérations sur les cadavres, en fonction des
    instructions du DDSV local

47
Biosécurité
  • Matériel de base dans la voiture
  • Équipements de protection individuelle
  • Appareils de protection respiratoire jetables
    filtrants contre les aérosols (au minimum FFP2)
    avec soupape si possible
  • Lunettes de protection contre les
    poussières(réutilisables)
  • Gants de protection étanches résistants aux
    agressions mécaniques
  • (si pas de risque de coupure, déchirure ou
    perforation, gants à usage unique)
  • Vêtements de protection à usage unique ,si pas de
    capuche charlotte
  • Bottes étanches, surbottes
  • Désinfectants usuels virucides homologués

48
Procédure pour enlever les équipements de
protection individuels
  • But protéger la voie respiratoire et lœil
  • Ordre important
  • Lavage des mains itératif indispensable à
    différentes étapes
  • Retrait des gants (laver au préalable mains
    gantées)
  • Retrait de la combinaison jetable en évitant de
    toucher effets personnels et cheveux
  • Lavage des mains
  • Retrait des lunettes
  • Retrait de lappareil de protection respiratoire
  • Lavage des mains et du visage

49
Procédure pour enlever les équipements de
protection individuels
  • Jeter les protections individuelles à usage
    unique dans un sac hermétiquement fermé
  • Nettoyer et désinfecter les protections
    individuelles réutilisables
  • Opérations dans la zone intermédiaire
  • Désinfection du véhicule

50
Remerciements crédits photos et illustrations
  • Ilaria CAPUA
  • Samuel BOUCHER
  • Jean-Marc HUGUET
  • Dominique BALLOY
  • Cab. vet. SEL BAILLEUL-SEGUIN
  • Jean-Luc GUERIN, ENVT
  • Marc ARTOIS, ENVL
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