CELLULES MYELOIDES MONOCYTES, MACROPHAGES, CELLULES DENDRITIQUES

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CELLULES MYELOIDESMONOCYTES, MACROPHAGES,
CELLULES DENDRITIQUES
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MONOCYTES
IDENTIFICATION PAR MORPHOLOGIE (petits monocytes
lymphocytes), ADHERENCE (commune à macrophages
et monocytes), PHAGOCYTOSE (macrophagegtmonocyte).
IDENTIFICATION CYTOCHIMIQUE (plus sensible mais
délicat à mettre en uvre).
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MONOCYTES HUMAINS HETEROGENEITE
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MONOCYTES MURINS
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MONOCYTE HETEROGENEITE

• Les monocytes humains CD14CD16- sont définis
  comme classique et représentent 90-95 des
  monocytes circulants chez un sujet sain. La sous
  population CD14CD16 représente 5-10 des
  monocytes et est appelée non classique ou
  pro-inflammatoire (moins dIL-10 et plus de TNF
  en réponse à un ligand de TLR4).Cette sous
  population représenterait celle des précurseurs
  circulants des DC migratoires.
• Les monocytes murins CCR2CX3CR1low exprimant des
  taux importants de Gr1 (granulocyte antigen 1)
  sont les équivalents des monocytes humains
  CD14CD16-. Mais contrairement aux monocytes
  humains, cette population est inflammatoire. La
  sous population CCR2-CX3CR1high exprimant
  faiblement Gr1 est léquivalent de la sous
  population humaine CD14CD16.
• Le transfert de monocytes-GFP Les
  CCR2-CX3CR1high persistent plus longtemps après
  transfert et peuvent être récupérés des tissus.
  On les considère comme des monocytes résidents.
  les CCR2CX3CR1low sont de durée de brève après
  transfert mais sont recrutés au niveau
  inflammatoire (uprégulation CD11c et MHCII)
• Après déplétion monocytaire avec des liposomes
  clodronate, les premiers monocytes à réapparaître
  sont les CCR2 et pourraient être les précurseurs
  des CCR2-.

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TRAFFIC DES CELLULES MYELOIDES
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TRAFFIC DES CELLULES MYELOIDES SELECTINES

• L-selectin deficient mice
• Initial rolling normal, decreased secondary
  rolling
• Decreased leukocyte recruitment
• Decreased delayed contact hypersensitivity
• Reduced susceptibility to LPS
• Delayed rejection of skin allografts
• P-selectin deficient mice
• Increased circulating leukocyte number
• Complete absence of leukocyte rolling at early
  points
• Reduced leukocyte recruitment at early points
• Normal delayed contact hypersensitivity
• Normal delayed rejection of skin allografts
• E-selectin deficient mice
• Normal inflammatory responses
• Increase in leukocyte rolling on TNF-treated
  venules
• Moderate impairment of stable adhesion

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TRAFFIC DES CELLULES MYELOIDES INTEGRINES
b2 INTEGRIN FAMILY LFA1 ICAM-1-3 MAC1
ICAM-1, iC3b, polysaccharides, factor X,
fibrinogen P150,95 ICAM-1, iC3b, heparin,
fibrinogen adb2 ICAM-3

• LFA-1-/- and MAC-1-/-
• Neutrophil trafficking impaired in LFA-1-/- mice
  and only at late points in Mac-1-/- mice
• Severe deficiency in phagocytosis, oxidative
  burst, degranulation and adhesion of neutrophils
• Severe deficiency in T cell functions
• ICAM-1-/-
• Abnormalities of neutrophil inflammatory
  responses
• Diminished contact hypersensitivity
• Defective allogenic T-cell responses
• Resistance to lethal effects of endotoxins

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TRAFFIC DES CELLULES MYELOIDES INTEGRINES
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TRAFFIC DES CELLULES MYELOIDES CHEMOKINES
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TRAFFIC DES CELLULES MYELOIDES CHEMOKINES
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TRANSENDOTHELIAL MIGRATION
PECAM-1 (Platelet/endothelial Cell-Adhesion
molecule 1 forme des interactions entre
leukocytes et endothélium. Ceci active les
intégrines b1 et b2 qui peuvent alors se lier à
ICAM, VCAM et JAM ou à des molécules de la
matrice extracellulaire.
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TRANSENDOTHELIAL MIGRATION

• DEFICIT PECAM-1
• Anti-PECAM-1 bloquent la diapédèse des leucocytes
  in vitro et in vivo
• PECAM-1 KO (fond génétique FVB) ont une réduction
  de lémigration des leucocytes dans des modèles
  inflammatoires (péritonite par thioglycolate
  dermatite par huile de croton). PECAM-1 KO (fond
  génétique C57BL/6) sont peu affectées.
• DEFICIT EN JAM-A
• Les souris JAM-A KO ont une augmentation de la
  migration au hasard des DC et de leur capacité à
  transmigrer. De même lhypersensibilité de
  contact est augmentée.
• Diminution de la transmigration des neutrophiles
  mais pas des lymphocytes. Augmentation de
  ladhésion des neutrophiles à lendothélium et
  entrappement de ces derniers entre cellules
  endothéliales et membrane basale.

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RECONNAISSANCE

• PATHOGEN-ASSOCIATED MOLECULAR PATTERN (PAMP)
• Produced by pathogens but not by host cells
• Invariant between microorganisms of a given class
• Are essential for microbial survival
• Are illustrated by lipopolysaccharide,
  lipoproteins, peptidoglycans, lipoteichoic acids
• PATTERN-RECOGNITION RECEPTORS (PRR)
• Secreted PRRs MBL, CRP, LBP
• Cell-surface PRRs CD14, mannose receptor,
  scavenger receptor, Marco
• Intracellular PRRs PKR, NODs

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RECONNAISSANCE TLR
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PHAGOCYTOSE
DEPENDANTE DES OPSONINES
REPONSE MICROBICIDE
RECEPTEURS Fc des IgG RECEPTEURS du COMPLEMENT
INDEPENDANTE DES OPSONINES
ABSENCE DE REPONSE MICROBICIDE
RECEPTEUR LECTINES RECEPTEUR SCAVENGER INTEGRINES
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PHAGOCYTOSE RECEPTEURS Fc
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PHAGOCYTOSE LECTINES
RECEPTEUR LECTINE TYPEC
RECEPTEUR LECTINE TYPE NK
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PHAGOCYTOSE LECTINES
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ACTIVITE MICROBICIDE DES MONOCYTESMECANISMES
DEPENDANT DE LOXYGENE
NADPH OXYDASE
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ACTIVITE MICROBICIDE DES MONOCYTESMECANISMES
DEPENDANT DE LOXYGENE
-
NOS 2 KO INCREASED SUSCEPTIBILITY L.
monocytogenes M. tuberculosis L. major T.
Gondii HSV-1
Glucocorticoids IL-4, IL10
NITRIC OXIDE SYNTHASE

Cytokines-microbial products LPS, IFNg, TNF
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ACTIVITE MICROBICIDE DES MONOCYTESMECANISMES
INDEPENDANT DE LOXYGENE
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ACTIVITE MICROBICIDE DES MONOCYTESMECANISMES
INDEPENDANT DE LOXYGENE
FER
METABOLISME DU TRYPTOPHANE APOPTOSE CYTOKINES
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MACROPHAGE DIFFERENTIATION
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MACROPHAGES TISSULAIRES RATE
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MACROPHAGES TISSULAIRES FOIE
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MACROPHAGES TISSULAIRES TISSU NERVEUX
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(No Transcript)
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MACROPHAGES TISSULAIRES ET AGRESSION
EPITHELOID CELL
TISSUE MACROPHAGE
CYTOKINES
MICROBIAL PRODUCTS
ELICITED MACROPHAGE
ACTIVATED MACROPHAGE
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MACROPHAGE POLARISATION
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MACROPHAGE POLARISATION
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MACROPHAGE POLARISATION
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DIFFERENCIATION DES CELLULES DENDRITIQUES
La culture de monocytes en présence dIL-4 et
de GM-CSF conduit à des DC myéloïdes
immatures. In vivo, les DC sont générées à partir
de monocytes mobilisés par FLT3L (fms-related
tyrosine kinase ligand 3). Les Dc peuvent être
produites par culture de précurseurs hématopoiëtiq
ues CD34.
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CELLULES DE LANGERHANS
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CELLULES DENDRITIQUES
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CELLULES DENDRITIQUES
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MIGRATION DES CELLULES DENDRITIQUES

• Les DCs migrent par les vaisseaux lymphatiques
  vers les ganglions. Les vaisseaux lymphatiques
  ont une lumière large, une paroi fine à la façon
  des capillaires sinusoïdes du foie et de la rate.
  
• Les DCs entrent dans la lymphe via les
  lymphatiques initiaux. Une interaction entre DCs
  et endothélium lymphatique est nécessaire elle
  implique ICAM-1 (non-DCs) et JAM-1 (DCs
  endothélium).
• La mobilisation des DCs humaines dépend de CCR7
  lexpression de CCR7 est induite en même temps
  que la maturation. Les souris CCR7-/- ont un
  déficit de migration des DCs dans les ganglions.
  Le transfert adoptif de DCs CCR7-/- induit une
  récupération déficiente à partir des ganglions
  contrairement au transfert des Dcs CCR7/. CCR7
  doit être sensibilisé pour fixer ses ligands
  CCL19 et CCL21.
• Les DCs arrivent au niveau des vaisseaux
  lymphatiques périphériques en répondant à un
  gradient de ligands de CCR7 CCL19 et CCL21. leur
  origine est la paroi du vaisseau lymphatique. La
  migration des DCs vers le ganglion est fortement
  perturbée dans les souris plt qui nexpriment pas
  CCL19. Une des fonctions de CCL19 est lextension
  des dendrites par les DCs.

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POLARISATION ET CELLULES DENDRITIQUES
La cellule T naive reçoit 3 signaux qui sont
fournis par les DCs matures sous linfluence des
pathogènes Signal 1 ligation du TCR par
peptide/MHC Signal 2 costimulation Signal 3
polarisation (Th1 IL12, IL23, IL27, IFN type
Th2 MCP-1, OX40-L, IL-10, TGFb Le contact DC-T
Cell via CD40-CD40L est nécessaire à une
activation soutenue
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ARTICLES DE REFERENCE

• 1 Randolph G.J. et al 2002. The
  CD16()(FcgRIII()) subset of human monocytes
  preferentially becomes migratory dendritic cells
  in a model tissue setting. J. Exp. Med. 196,
  517-527.
• 2 Landsman L. et al. 2007. Distinct
  differentiation potential of blood monocytes
  subsets in the lung. J. Immunol. 178, 2000-2007.