Jornada sobre Calidad del Agua para Dilisis Aspectos Microbiolgicos

1
Jornada sobre Calidad del Agua para
DiálisisAspectos Microbiológicos

• Dra. Cristina Bazet
• 1º de agosto 2005

2

• Adherir a los criterios microbiológicos más
  estrictos.
• Optimizar y racionalizar los estudios
  microbiológicos.
• Contribuir en la redacción de Guías Nacionales.

3
Adherimos a la modalidad de mayor exigencia en
cuanto al contenido microbiológico del agua y
fluídos empleados en procedimientos de HD

• La estimulación repetida del sistema inmune por
  parte de las bacterias y sus productos ( endo y
  exotoxinas ) resulta en activación de los
  monocitos , liberación de citoquinas e
  inflamación crónica.
• Relacionadas con complicaciones agudas y
  crónicas.
• Se estimulan los monocitos con niveles
  plasmáticos bajos ( 0.5 UE) y ya producen IL
  1 incubados con 0.250 UE/ml de endotoxina.
• El estímulo se potencia con la exposición
  acumulada y la presencia de coadyuvantes, por
  lo que puede haber reacciones no deseadas aún
  con los indicadores aceptables.
• Nephrol Dial Trnsplant 2000 15 528

4

• Normas Europeas fijan en 0.250 UE/ml (escaso
  margen de seguridad)
• Si el origen de la endotoxina y otras sustancias
  ( exotoxinas,peptidoglicanos,
  muramilpéptidos) con capacidad pirogénica es la
  contaminación bacteriana esta debe ser la menor
  posible.
• Impacto en la formación del biofilm aún con bajos
  recuentos bacterianos.
• La excelente capacidad del LD como medio de
  cultivo bacteriano.
• Reutilizacion de fibras.
• Empleando criterios microbiológicos más
  estrictos, los efectos no deseados agudos y las
  complicaciones crónicas tienden a disminuir.

5
Calidad Microbiológica del agua

• Farmacopea Europea
• Agua lt100 ufc/ml lt 0.25 UE/ml
• LD lt1000 ufc/ml
• AAMI
• Agua lt200 ufc/ml lt 2 UE/ml
• LD lt2000ufc/ml

6

• LíMITES PERMISIVOS.
• MÁRGENES DE SEGURIDAD ESCASOS.
• OPERATIVIDAD AL SISTEMA.
• AUMENTAR LA SENSIBILIDAD EN LA DETECCIÓN
  MICROBIANA.

7
Control Microbiológico del agua

• (Objetivo) Conocer el número de bacterias viables
  presentes en el agua (Método) cultivando una
  cantidad de agua conocida en un medio de cultivo
  y contando el Nº de colonias visibles en un
  medio sólido (placa de agar) y depende de la
  composición del medio, la temperatura y el tiempo
  de incubación. (Sensibilidad de detección)

8
Calidad Microbiológica del agua
9
Calidad Microbiológica del agua

• Metodología de estudio
• Extensión en superficie. (Spread plate)
• Inclusión en agar.
• Membrana filtrante.
• Todos los ensayos proveen recuperación microbiana
  aceptable y comparable.
• CDCArduino MJ. J Clin Microbiol
  1991 29 592-594

10
Calidad Microbiológica del agua

• Culture of dialysis fluids on nutrient rich media
  for short periods at an elevated temperature
  underestimate microbial contamination.
• Pass T et al. Blood Purif 1996 136-145

11
Taller de Consenso Metodología de estudio del
agua para diálisis. Laboratorio de Microbiología
Clínica y Cátedra de Nefrología, Hospital de
Clínicas. Fac. de Med. Junio/2005

• Objetivo Mejorar la sistemática metodológica y
  la sensibilidad de los estudios.
• Recomendaciones
• Volúmenes conocidos standarizados 0.1, 0.5 , 1 ml
• Medios de cultivo TSA ,R2A,
• Temperaturas 21ºC y 35ºC
• Tiempo de incubación entre 7 y 14 días.
• Técnica Siembra por extensión en placa.
• Membrana filtrante. (100ml)
• En presencia de efectos no deseados no alcanza
  con la cuantificación, es necesario análisis
  cualitativo.
• COSTOS

12
Control Microbiológico

• Recuento de heterotrofos. Nº total bacteriano.

13
Control Microbiológico

• Bacterias fotosintéticas utilizan la energía
  solar
• Bacterias quimiosintéticas utilizan compuestos
  inorgánicos
• Bacterias heterotróficas utilizan compuestos
  orgánicos. Todas las bacterias saprofitas y
  patógenas.
• Término genérico para designar las bacterias
  del agua con escasos requerimientos nutricionales

14
Control Microbiológico

• Recuento de Heterotrofos. Nº total bacteriano.
• Indicadores fecales.
• Detección y cuantificación de endotoxinas.
• Cualitativo cuando sea necesario.
• Mycobacterias y hongos.

15
Bacilos Gram negativos No fermentadores

• Ubicación taxonómica incierta, fenotípicamente
  similares, actividad bioquímica escasa, inertes.
• Difícil categorización y especiación aún
  empleando todos los kits comerciales disponibles
  en el medio, identificación presuntiva basada en
  reacciones bioquimicas de baja especificidad.
• Kits bioquímicos comerciales con diferente
  performance.
• Variable accesibilidad en el país.
• Complica reproducibilidad de resultados
  intralaboratorio e interlaboratorios.
• Pseudomonas,Stenotrophomonas, Burkholderia,
  Achromobacter, Acinetobacter, Ralstonia,
  Agrobacter, Moraxella, Brevidimonas, etc

16
Bacilos Gram negativos No fermentadores
17
Centralización de los estudios microbiológicos

• La participación de un mismo equipo de
  laboratorio en el seguimiento, mantenimiento y
  control microbiológico del agua, en el
  procesamiento de los materiales clínicos de los
  pacientes y en la resolución de los problemas, de
  un mismo Centro de Diálisis, mejora y acelera
  la ubicación y resolución de los eventos
  infecciosos.
• Mejora la trazabilidad en la investigación de un
  brote y condiciona la rapidez en la toma de
  decisiones.

18
Redactar Guías Nacionales

• Algoritmos de validación, mantenimiento y
  problemas.
• Frecuencia y tipo de controles, puntos de
  recolección, técnica microbiológica,
  interpretación de resultados.
• Cuando iniciar acciones correctivas.
• Qué tipo de acciones.
• Controles post-desinfección.