Presentacin de PowerPoint

1
Descubrimiento de la transferencia del T-DNA de
Agrobacterium tumefaciens
Carmen Espinoza Cancino Doctorado en Ciencias
Biológicas Mención Genética Molecular y
Microbiología Pontificia Universidad Católica de
Chile
2
Agalla de la corona
3
Agrobacterium tumefaciens
4
Primeros antecedentes Las células del tumor
están transformadas
1941 - Link y Eggers auxinas -
White y Braun cultivos de tumores in vitro
1947 Braun Principio Inductor de
Tumor 1958 Klein citoquininas 1964
Menagé y Morel octopina 1968 Goldman, Tempé y
Morel nopalina
5
Principio Inductor de Tumor
Reguladores de crecimiento
?
Bacteriófagos
DNA
6
Presencia de DNA de Agrobacterium en las células
tumorales
Schilperoort, 1967
7
DNA de Agrobacterium no es detectado en las
células tumorales
Cinética de Renaturación de DNA
DNA de células tumorales (exceso)
DNA Agrobacterium (trazas)
DNA bacteriano DNA homólogo en tumor
Chilton, 1974
8
DNA de Agrobacterium no es detectado en las
células tumorales
DNA células tumorales
DNA hojas tabaco
Chilton, 1974
DNA callos normales
9
Plasmidio Ti de Agrobacterium tumefaciens
Zaenen, 1974
10
Plasmidio Ti de Agrobacterium tumefaciens
Zaenen, 1974
11
Plasmidio Ti de A. tumefaciens es fundamental
para la inducción de tumores
Van Larebeke, 1974
12
Transferencia del plasmidio Ti entre cepas de
Agrobacterium
A. tumefaciens cepa C58-C1 no patogénica
A. Rhizogenes cepa 223 patogénica
colonias C58-C1 patogénicas
Presencia plasmidio Ti
Van Larebeke, 1975
13
(No Transcript)
14
Transferencia del plasmidio Ti a células
vegetales
Renaturación sonda plasmidio Ti
DNA células tumorales
DNA Agrobacterium
DNA callos normales
DNA salmón
Chilton, 1977
15
Transferencia del plasmidio Ti a células
vegetales
Fragmentos SmaI
Chilton, 1977
16
Transferencia del plasmidio Ti a células
vegetales
Renaturación sonda banda 3
DNA células tumorales
DNA Agrobacterium
DNA callos normales
DNA salmón
Chilton, 1977
17
Transferencia del plasmidio Ti a células vegetales
Chilton, 1977
18
Transferencia del plasmidio Ti a células vegetales
Renaturación sonda
Banda 3b
Banda 3a
DNA células tumorales
DNA Agrobacterium
DNA callos normales
DNA salmón
Chilton, 1977
19
Transformación genética de plantas
20
Expresión de genes foráneos en tabaco
Herrera-Estrella, 1983
21
Expresión de genes foráneos en tabaco
14C-Cloramfenicol-acetilo
CAT
14C-Cloramfenicol Acetil-CoA
Herrera-Estrella, 1983
22
AbetoAcelgaAlfalfaAlgodónAlamoArabidopsisArr
ozArvejaCamoteCaña de azucarCebadaCentenoCla
velCrisantemo
Plantas que han sido transformadas genéticamente
Espárrago Eucalyptus Frambuesa Frutilla Kiwi Lechu
ga Lirio Maíz Maní Manzana Maravilla Orquidea Papa
Papaya Petunia Pera
Pino Plátano Poroto Poroto de soya Remolacha Repol
lo Rosa Sorgo Tabaco Tomate Tulipán Trigo Vides Za
nahoria Zapallo
23
Tendencias en el desarrollo de plantas
transgénicas
Modificaciones de alimentos Propiedades de la
madera Plantas como biorreactores
Tolerancia al estrés Modificación de
flores Contenido nutricional
24
(No Transcript)
25
(No Transcript)
26
Transferencia T-DNA
27
Presencia de DNA de Agrobacterium en las células
tumorales
Schilperoort, 1967
28
Cinética de Renaturación de DNA
DNA de células tumorales
DNA Agrobacterium
Alícuotas en capilares
Baño agua hirviendo 5 min
Baño agua 25C bajo la Tm DNA bacteriano
tiempos
Columnas hidroxilapatita 70C
Formación de Duplex
Cuantificación radiactividad
Chilton, 1974
29
Transferencia del plasmidio Ti a células
vegetales
Temperatura disociación del duplex
Chilton, 1977
30
Tendencias en el desarrollo de plantas
transgénicas
Modificaciones de alimentos Descoloración de
frutos Dulzor de frutos Carotenos Propiedades de
la madera Celulosa Lignina Plantas como
biorreactores Producción de Anticuerpos Polímeros
Proteínas de origen animal Vacunas orales
Tolerancia al estrés Estrés Oxidativo Estrés
Salino e Hídrico Modificación de
flores Pigmentación de flores Sexo de plantas
Contenido nutricional Aminoácidos y
proteínas Lípidos Polisacáridos Almidón Fructanos.

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Expresión de genes foráneos en tabaco
Herrera-Estrella, 1983
32
Plasmidio Ti está presente en el núcleo de las
células tumorales
Southern blot Sonda pTi
Chilton, 1980