Diapositiva 1

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Diagnóstico genético preimplantacional en
trastornos del crecimiento miras al
futuro Dra. M.J. Trujillo-Tiebas Dpto. de
Genética Fundación Jiménez Díaz- CAPIO
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PATOLOGÍAS DEL CRECIMIENTO
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Malformaciones esqueléticas

• DISRUPCIÓN Malformación 2ª en huesos. Ej
  Talidomida rubeóla.
• DISOSTOSIS Malformación de un hueso de forma
  asilada ó en combinación. Mutaciones en genes que
  se expresan en un periodo concreto de la
  embriogénesis.
• DISPLASIA Alteraciones del desarrollo de hueso y
  cartílago. Mutaciones en genes que se expresan en
  periodo prenatal y a lo largo de la vida. Son
  simétricas y suelen asociarse a enanismo.

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• DISRUPCIÓN Malformación 2ª en huesos.
• Talidomida .

Rubeóla
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• DISOSTOSIS Malformación de un hueso de forma
  asilada ó en combinación. Mutaciones en genes que
  se expresan en un periodo concreto de la
  embriogénesis.
• Pycnodisostosis
• Recesiva Gen CSTK 1q21
• Proteína Catepsina K implicada en
• degradación de matriz osea.
• Expresión en osteoclastos.

Touluse-Lautrec
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DISPLASIA OSEA Alteraciones del desarrollo de
hueso y cartílago. Mutaciones en genes que se
expresan en periodo prenatal y a lo largo de la
vida. Son simétricas y suelen asociarse a
enanismo.
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CONSULTA DE GENÉTICA
Árbol genealógico Antecedentes
Familiares Edades de los padres Consanguinidad
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• Consulta de Genética y Laboratorio
• Identificar los individuos en riesgo
• (modelo de herencia)
• Conocer el gen y la mutación (alteración
  molecular)
• para confirmar el diagnóstico clínico
• Consejo genético adecuado

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CONSEJO GENÉTICO
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1988 Spranger Familia de Acondroplasia,
Hipocondroplasia Displasias
Tanatofóricas Hallazgos clínicos radiológicos
histológicos Genética Mutaciones en FGFR-3
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Genes de Receptores de factores de crecimiento
de fibroblastos

• FGFR1 8p11.2-p11.1
• FGFR2 10q26
• FGFR3 4p16.3
• FGFR4 5q35.1-qter

Proliferación celular Diferenciación
celular Migración celular
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Herencia autosómica dominante 50 hijos sanos
AA 50 hijos afectos AA ? hembras y varones
afectados en varias generaciones trasmisión
varón a varón
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ACONDROPLASIA

• Displasia ósea más frecuente (126000)
• Detección 21 -30 semanas de gestación
• Herencia autosómica dominante
• Mutación Gly380Arg recurrente
• Elevada tasa de mutaciones de novo
• Activación del receptor FGFR-3
• independiente de ligando
• Inhibición del crecimiento de condrocitos

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ACONDROPLASIA

• Problemas asociados
• Evidentes limitaciones físicas
• Complicaciones neurológicas debido a
  hidrocefalia
• Otitis recurrentes y sordera
• Problemas respiratorios
• Dolores de espalda por compresión
• de vertebras

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ACH
Origen paterno Presente en el 98 casos
HCH
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HIPOCONDROPLASIA
PSEUDOACONDROPLASIA
ACONDROPLASIA
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DISPLASIAS TANATOFÓRICAS
Displasias óseas letales más frecuentes Detección
20-24 semanas de gestación Rasgos Clínicos

• Acortamiento de miembros
• Cavidad torácica reducida

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DISPLASIAS TANATÓFORAS

• TIPO I
• Fémures curvos
• Cráneo normal
• Múltiples mutaciones asociadas

• TIPO II
• Fémures rectos
• Cráneo en trébol
• Una mutación asociada

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OBJETIVO DE ESTUDIO ADN (molécula) formando
parte de los cromosomas GEN (unidad de
información) LOCALIZACIÓN NÚCLEO CELULAR
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Sangre LA BC Céls. bucales
Extracción del ADN
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PCR Reacción en Cadena de la Polimerasa Técnica
del ADN Amplificación in vitro de secuencias
específicas de ADN
Conseguir más de 1 millón de copias de un
segmento de ADN que nos interese analizar
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CROMOSOMAS LIBROS (46 2323) GEN CAPÍTULO ADN
4 LETRAS MUTACIÓN ERROR
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Código Genético
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(No Transcript)
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SECUENCIACIÓN Detección de mutaciones
(ERRORES)
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CONSEJO GENÉTICO
?Herencia dominante 50 ?Matrimonios 50
acondroplásicos 25 mortinatos 25 sanos
?Penetrancia completa ?Edad paterna ?Problemas
asociados ?Diagnóstico prenatal factible/
Preimplantacional posible Diagnóstico en ADN
fetal !!!
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DIAGÓSTICO PRENATAL
ACH HCH NO detectables por ecografía hasta el 3
trimestre ACH en homocigosis ? TD
Displasias Tanatóforas Displasias óseas letales
más frecuentes Detección 20-24 semanas de
gestación 2 trimestreAcortamiento de
miembros Cavidad torácica reducida
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?
?
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DIAGNÓSTICO PRENATAL
?Confirmación genética de la enfermedad en el
padre/madre afectado previo a la concepción ?
Buscar la mutación en el feto

• Personal con gran experiencia en las técnicas de
  análisis genético

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• Aconsejar Diagnóstico Prenatal !!
• Mejor LA que BC !!

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Aconsejar Diagnóstico Prenatal ante cualquier
dato ecográfico dudoso!!
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DIAGNÓSTICO PRENATAL
VELLOSIDADES CORIALES biopsia
corial (a partir de 9-11 sem. gestación) LÍQUIDO
AMNIÓTICO amniocentesis (a
partir de 14-16 sem. gestación) SANGRE
FETAL funiculocentesis (a partir de 18 sem.
gestación)
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BIOPSIA CORIAL
Transabdominal (14-16 sem.)
Transcervical (9 - 11 sem.)
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LíQUIDO AMNIÓTICO
Transabdominal (14-16 sem.)
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ADN materno
ADN fetal
3-6
SIN RIESGO PARA EL FETO
Lo y cols, 1997
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METODOLOGÍA
Extracción de ADN
Recogida de sangre materna
Obtención del Plasma
1
3
2
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CARACTERÍSTICAS
Mezclado con ADN de origen materno
Proporción aumenta a lo largo de la gestación
(3-6)
ADN fragmentado
Poca cantidad
Limita el estudio a secuencias de origen paterno
no presentes en la madre
Técnicas muy sensibles
Difícil análisis
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Diagnóstico Prenatal no invasivo
Gly GGG ? AGG Arg
ADN fetal en sangre materna 8 sem 10 sem
Cuando el papá es ACH !!
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ESTUDIO PRE-IMPLANTACIONAL El uso clínico del
PGD se basa en la selección de embriones sin la
mutación. Tratamiento anticonceptivos
estimulación ovárica Punción ovárica Fecundación
en laboratorio FIV ICSI Estudio
genético Transferencia Espera resultados vuelta
a empezar ó congelación de sobrantes
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ESTUDIO PRE-IMPLANTACIONAL El uso clínico del
PGD se basa en la selección de embriones sin la
mutación. Tiempo de espera, caro, tratamiento
hormonal. Poco tiempo para hacer la PCR y el
análisis ( 24h) Amplificaciones de difícil
interpretación ADO (Allele Drop Out), pérdida de
amplificación específica Riesgo de desechar
embriones sanos Embriones sobrantes ??
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(No Transcript)
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TÍTULO DEL PROYECTO ESTUDIO DE LAS BASES
MOLECULARES DE LAS MALFORMACIONES CONGÉNITAS
CARDIOVASCULARES, OCULOFACIALES Y ESQUELÉTICAS
Dra. I. Lorda Dra.C.Ayuso Dra. C. Ramos Dra. M.
Rguez de Alba Dra. María Fenollar
Cortés Dra. Mª José Trujillo Tiebas
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María Fenollar Cortés MªJosé Trujillo
Tiebas Diagnóstico e investigación
Jesús Gallego DGP
Ana Bustamante - ADN fetal
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Gracias por vuestra atención !!!